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丙烯酰胺对施万细胞源性神经生长因子及受体的影响
目的 探讨施万细胞(Schwann cells,Scs)源性神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及其受体(TrkA、P75)在丙烯酰胺(acrylamide,ACR)所致运动神经元损伤及损伤后自然修复过程中的变化.方法 原代培养大鼠Scs,插入式混合培养Scs与运动神经元VSC4.1,ACR(终浓度为40 μg/ml)染毒24 h,染毒后去除毒物暴露24 h,建立ACR损伤及损伤后自然修复的细胞模型；Western-blot和RT-PCR分别检测混合培养体系中Scs所分泌的NGF及其受体TrkA、P75的蛋白和mRNA水平变化.结果 ACR对混合培养体系内的运动神经元VSC4.1具有明显细胞毒性,细胞形态损伤显著,去除ACR暴露后损伤减轻；与对照组相比,ACR染毒24 h及自然修复24 h,NGF蛋白含量显著增加(P＜0.05),ACR染毒24 h后P75含量减少(P＜0.05),修复24 h,P75的含量变化不显著(P＞0.05),未检出TrkA蛋白表达；与对照组相比,ACR染毒24 h,NGF mRNA、TrkA mRNA、P75 mRNA表达水平显著升高(P＜0.05)；修复24 h,NGF mRNA表达水平无明显改变(P＞0.05),TrkA mRNA、P75 mRNA水平显著降低(P＜0.05).结论 施万细胞源性NGF在ACR对运动神经元VSC4.1损伤及修复过程中与其受体结合,通过正负反馈调节发挥一定的神经元保护作用.
关键词： 施万细胞 丙烯酰胺 运动神经元VSC4.1 神经生长因子及其受体 -
雪旺细胞在ACR对运动神经元损伤及修复过呈中的作用研究
目的 探讨雪旺细胞( Schwann cells,SCs)在丙烯酰胺(acrylamide,ACR)对运动神经元损伤及修复过程中的作用.方法 原代培养大鼠SCs,用插入式培养皿进行SCs与运动神经元VSC4.1的混合培养；噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度ACR对单独和混合培养运动神经元VSC4.1相对存活率的影响；细胞免疫荧光法检测ACR损伤和修复过程中运动神经元VSC4.1中生长相关蛋白43( growth-associated protein,GAP-43)水平的变化.结果 ACR染毒运动神经元VSC4.1 24 h,单独培养组的IC50为329μg/ml,混合培养的IC50为558μg/ml; GAP-43的水平较对照明显降低,混合培养组GAP-43的平均荧光强度(0.076±0.008)高于单独培养组(0.037±0.013),P＜0.05.VSC4.1染毒24h后去除ACR暴露并继续培养24h,GAP-43的水平较染毒24h时上升,混合培养组GAP-43的平均荧光强度值(0.241±0.033)高于单独培养组(0.143±0.034),P＜ 0.05.结论 ACR对运动神经元VSC4.1具有明显的毒性作用,SCs对ACR所致运动神经损伤具有保护作用,同时对损伤后修复过程发挥一定的促进作用.
关键词： 雪旺细胞 丙烯酰胺 运动神经元VSC4.1 生长相关蛋白43
