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线粒体DNA突变与大鼠乙醇性肝纤维化的关系
目的 对线粒体DNA ATP酶6,8基因(mtDNA ATPase 6,8gene)突变与乙醇性肝损伤发生发展之间的关系进行研究,从一个新的角度对乙醇性肝病(ALD)的发病机制进行探讨.方法 应用乙醇加橄榄油灌胃的方式建立大鼠乙醇性肝损伤动物模型并设对照组(等量生理盐水),成模后进行肝脏组织学观察,PCR扩增各组线粒体DNA ATPase 6,8基因并进行序列测定.以生物发光法分别测定各组肝组织中ATP含量,判定ATPase 6,8基因突变对肝细胞内ATP能量合成的影响.结果 模型组大鼠肝细胞线粒体出现形态学的改变;线粒体DNA ATPase 6亚基基因发现两处点突变;对照组未检出突变.模型组大鼠肝细胞内ATP含量明显降低(P＜0.05).结论 持续过量的乙醇摄人可造成肝细胞线粒体形态和mtDNA ATPase基因突变,这可能是乙醇性肝损伤的重要发病机制.
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肌浆网钙ATP酶基因转导治疗心力衰竭——从基础到临床
心力衰竭( heart failure,HF)是多种心血管疾病晚期共同的临床综合征,严重危害着人类的健康.近年来,尽管药物治疗以及植入性机械装置治疗方面取得了长足的进步,但其发生率和致死致残率依旧居高不下.基因治疗,特别是以肌浆网钙ATP酶2a(sarco/endoplasmic reticulum calcium ATPase 2a,SERCA2a)为靶基因的治疗方法为HF的治疗提供了新的思路.鉴于在动物实验中取得的显著效果,该疗法已进入临床研究阶段.本文就以SERCA2a为靶点的HF基因治疗做一综述,重点介绍其作用机制和临床研究方面的进展.
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耐氟菌株及其亲代菌株ATP酶基因的DNA测序
目的对变型链球菌耐氟菌株及其亲代菌株的胞膜ATP酶基因进行DNA序列分析.方法分别制备变链菌株Ingbritt及其耐氟菌株Ingbritt-FR的菌悬液(OD600nm=1.0),经溶菌酶、Lysis消化.按已知ATP酶基因引物设计、扩增ATP酶各片段.将ATP酶基因连接至PUCm-T克隆载体,转化后经限制性内切酶酶切鉴定为阳性克隆.采用DG1G1E检测ATP酶基因, DNA测序试剂盒分析DNA序列.结果耐氟菌株与其亲代菌株的核苷酸序列无显著差别.结论 ATP酶基因改变不是变链菌株耐氟突变的机制.
