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  • 安神方的抗焦虑作用

    作者:张雪;黄仕营;张燊;丁秀芳;陈宝田

    目的 观察安神方颗粒的抗焦虑作用,并研究其机制.方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为6组(10只/组):正常对照组、模型组、地西泮组和安神方高、中、低剂量组.采用慢性情绪应激的方法建立焦虑大鼠模型,同时给予药物干预,以高架十字迷宫试验对其行为学进行评价.行为学观察后,麻醉处死正常对照组、模型组、地西泮组及安神方中剂量组大鼠,冰台上分离大鼠海马,冷冻离心后分离上清液,高效液相色谱法测定谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)含量;用免疫组织化学法测定γ-氨基丁酸受体(GABAAR)、N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)的表达.结果 与正常对照组比较,模型组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率明显减少;地西泮组与安神方高、中、低剂量组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率较模型组显著上升,以安神方中剂量组上升明显;模型组大鼠海马组织中谷氨酸的表达量较正常对照组显著上升,GABA的表达量明显下降;地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,大鼠海马组织中谷氨酸的表达量显著降低和GABA的表达量明显提高,安神方中剂量组与地西泮组比较差异不显著;模型组与正常对照组比较,GABAAR免疫阳性细胞表达减少,NMDAR1免疫阳性细胞表达表达增多;地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,NMDAR1的表达水平降低,GABAAR的表达水平提高,安神方中剂量组与地西泮组比较无明显差异.结论 安神方具有抗焦虑的作用,可以提高中枢GABA的含量,增强GABAAR的表达,降低谷氨酸含量,减少NMDAR1的表达.

  • GABAA受体在爪蟾卵母细胞的表达

    作者:张献全;钱桂生;顾全宝;赵剑星

    目的 将鼠源γ-氨基丁酸A型(GABAA)受体表达于爪蟾卵母细胞膜上并行功能测定。方法 微量注射仪将纯化的大鼠脑mRNA注入准备好的爪蟾卵母细胞内并于19℃温浴48 h以上使其表达;使用常规双电极电压钳记录卵母细胞表达的受体特性。结果 爪蟾卵母细胞注射大鼠脑mRNA 48 h后有GABAA受体的表达,此受体具有天然GABAA受体的氯通道特性。结论 爪蟾卵母细胞具有表达外源GABAA受体的特性,是研究GABAA受体生理和药理功能的一种重要工具。

  • 迷走神经刺激对戊四氮致痫大鼠丘脑网状核NMDAR1 mRNA和GABAARα1 mRNA的影响

    作者:章军建;张锦华

    为探讨迷走神经刺激(Vagus nerve stimulation, VNS)抗癫痫的作用机制,应用原位杂交组织化学及图像分析方法研究戊四氮(Pentylenetetrazol, PTZ)致痫大鼠丘脑网状核谷氨酸受体NMDAR1mRNA和γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)α1亚单位mRNA的变化.结果显示,PTZ致痫组大鼠丘脑网状核NMDAR1mRNA表达明显高于正常对照组,而VNS抗癫痫组明显低于PTZ致癫痫组.与之相反,PTZ致癫痫组GABAARα1mRNA的表达明显低于正常对照组,VNS抗癫痫组明显高于PTZ致癫痫组.上述结果表明,VNS可能通过抑制丘脑网状核兴奋性神经递质受体NMDAR的活动和增强抑制性神经递质受体γ-氨基丁酸受体GABAAR的活动,降低大脑皮层的兴奋性,抑制癫痫的发生和发展.

  • 神经肽Y对海人酸致痫大鼠中GABAB受体的影响

    作者:王坤;苏海涛;宋金东;李文玲;武江;董长征

    目的 探讨重组腺相关病毒载体神经肽Y(rAAV2/1-NPY-EGF-P)干预前后海人酸致痫大鼠海马中GABABR表达的变化.方法 将36只雄性Wistar大鼠随机分为三组:KA组(海人酸致痫大鼠组)、NPY组(神经肽Y干预组)及NS组(对照组).KA组大鼠海马CA3区注射海人酸,完成慢性模型,造模成功后不注射病毒;NPY组大鼠海马CA3区注射海人酸,完成慢性模型,造模成功后向脑室注射10μL滴度为5×10u vg/mL的神经肽Y进行基因转染;NS组海马CA3区注射等量的0.9%NaCl.三组大鼠各12只,在基因转染后2周、4周分别取6只观察其发作行为学变化,并采用RT-PCR检测GABABR的表达,以GAPDH为标准参照基因,以之定量分析基因表达的RQ值(相对定量值).结果 通过RT-PCR发现,KA组、NPY组及NS组、海马组织均有GABABR表达.KA组GABABR的基因表达较NS组呈下降趋势(P<0.05),NPY组GABABR的基因表达呈上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05).结论 KA组中GABABR的表达明显下降,NPY组中GABABR的表达呈上升趋势.说明GABABR基因表达的降低可能是导致癫痫发生、发展的重要因素.NPY可能通过改变抑制性神经递质的GAB-ABR的表达来达到调控癫痫发作的目的.

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