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人表皮聚角蛋白微丝蛋白的提取及其在类风湿关节炎诊断中的应用
目的建立从人表皮提取聚角蛋白微丝蛋白(filaggrin)抗原的方法,检测抗filaggrin抗体(AFA )在类风湿关节炎(RA)中的分布,探讨AFA对早期RA诊断的价值.方法从人表皮细胞中提取并部分纯化filaggrin抗原,经SDS-PAGE后用免疫印迹法检测(Wes tern blot) 103例类风湿关节炎(RA)血清和140例对照血清,包括系统性红斑狼疮(SLE)、干燥综合征(SS)、骨关节炎(OA)等.结果本研究方法提取的filaggr in能作为AFA免疫印迹检测的抗原.103例RA病人中AFA敏感性和特异性分别为35.9%、93.7 %,与疾病对照组和正常对照组相比,差异有显著性(P＜0.05).结论从人表皮提取和部分纯化filaggrin抗原,能满足免疫印迹检测的要求.用免疫印迹法检测RA患者的AFA抗体,对RA有较好的敏感性和特异性,可临床用于RA的诊断.由于基因的变异性,不同个体的filaggrin表达强弱不同.
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抗肿瘤转移多聚β肽聚乙二醇化的研究
目的:研究抗肿瘤转移多聚β肽的聚乙二醇(PEG)化的方法及其作用.方法:采用甲氧基聚乙二醇丙醛(mPEGALD5000)修饰多聚β肽;采用电泳和成像分析系统检测修饰率.以粘附实验检测生物活性.结果:(1)二聚β肽(β2)的修饰率为66.7%,三聚β肽(β3)为52.7%.(2)佳反应条件为:pH值为5,多聚β肽和mPEGALD5000的摩尔之比为1:10,反应温度为4℃,反应时间为24 h.(3)修饰后产物在4℃下可稳定放置50 d.(4)修饰后产物水溶解度增加.(5)β2,β2-PEG,β3和β3-PEG对SMMC-7721和HCCLM6细胞与纤连蛋白(FN)粘附均具有显著的抑制作用(P＜0.01),而且PEG修饰后作用显著增强(P＜0.05或P＜0.01).结论:采用mPEGALD5000能有效地将多聚β肽PEG化.多聚β肽和PEG修饰物对肿瘤细胞与FN的粘附具有特异的抑制作用,且PEG修饰后作用增强.
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冠心病患者血浆正五聚蛋白-3、血清超敏C-反应蛋白与血脂的相关性
目的:通过分别检测冠心病患者及正常人的血浆正五聚蛋白-3(PTX3)、血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)及各项血脂水平,探讨血浆PTX3水平在各组间的差异以及血浆PTX3、血清hs-CRP与血脂的相关性.方法:入选经冠脉造影正常的40例患者为对照组;冠脉造影确诊为冠心病的60例,分为稳定型心绞痛(SAP)组,20例;不稳定型心绞痛(UAP)组,20例;急性心肌梗塞(AMI)组,20例.分别检测各组入院第2d的血浆PTX3、血清h-CRP及各项血脂水平.血浆PTX3和血清hs-CRP水平取对数后均服从正态分布.对所得数据进行单因素方差分析、两变量相关分析及多元线性回归分析.结果:UAP组和AMI组患者的血浆PTX3对数水平显著高于SAP组和对照组的(P均＜0.05);SAP组与对照组之间差异无显著性(P>0.05);UAP组和 AMI组之间差异有显著性(P<0.05).患者血浆PTX3对数水平与低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)水平存在正相关(r=0.641,P<0.05),与总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)无线性相关(P均＞0.05);而血清hs-CRP对数水平与TG、TC、LDL-C呈正相关,且与HDL-C呈负相关(r值分别为0.325、0.228、0.625、-0.312,P均＜0.05).患者血浆PTX3对数水平与血清hs-CRP对数水平呈正相关(r=0.729,P>0.05).多元线性回归分析显示血浆PTX-3和LDL-C的相关性优于血清hs-CRP和LDL-C的(β=0.492,P=0.001:β=0.382,P=0.03).结论:血浆PTX3水平与血清hs-CRP水平呈正相关,PTX3是心血管疾病的独立危险因素,其与LDL-C的相关性优于hs-CRP.
