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补肾活血含药血清对体外高磷刺激下血管平滑肌细胞钙化的抑制作用
目的:观察补肾活血含药血清对体外高磷刺激下A7r5细胞钙化的抑制作用.方法:用NaH2PO4高磷溶液对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)进行刺激,建立体外血管钙化模型.制备补肾活血含药血清,分别按含药血清在体外培养基中所占比例5％、10％、20％设立补肾活血含药血清低、中、高三个剂量组,进行体外干预10 d.实验结束后,光学显微镜下观察细胞形态;茜素红染色法观察细胞钙化情况,分别在实验第2、4、6、8、10天观察细胞层钙含量及ALP活性,实验第3、6、10天观察细胞VSMCs标记蛋白α-SMA蛋白及成骨细胞标记蛋白ALP蛋白表达.结果:(1)与正常组比较,第10天经茜素红特殊染色,高磷模型组出现明显的钙化结节;同时,细胞钙含量及ALP活性均随时间延长不断升高,α-SMA蛋白表达下调,ALP蛋白表达上调.(2)与高磷模型组比较,第10天经茜素红特殊染色,含药血清低剂量组细胞形态改善不明显,中、高剂量组红色颗粒物明显减少,正常形态细胞数目较多;含药血清组细胞钙含量、ALP活性下降,α-SMA蛋白表达上调,ALP蛋白表达下调.结论:补肾活血含药血清能够减轻高磷所诱导的A7r5细胞钙化及细胞层钙沉积、AIP活性的升高,下调ALP蛋白表达,上调α-SMA蛋白表达,抑制VSMCs向成骨样细胞表型转化.
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白芍、赤芍化学成分差异及其对大鼠胸动脉平滑肌A7r5细胞的生物效应比较
目的比较白芍、赤芍水提物中所含化学成分的异同，及探讨白芍、赤芍水提物作用于体外大鼠胸动脉平滑肌株（A7r5）的生物效应差异。方法通过HPLC及质谱分析，比较白芍、赤芍水提物中各单体化学成分的共性与差异。采用体外培养A7r5，利用血小板源生长因子BB（PDGF-BB）诱导A7r5建立细胞增殖病理模型，加入不同剂量的白芍、赤芍水提物，通过MTT比色法和实时细胞分析仪检测细胞活性。结果白芍、赤芍在化学成分上有差别，即使两者拥有共同的成分，含量亦存在差异。在A7r5增殖研究显示，300μg/ml白芍水提液与A7r5对照组相比，细胞增殖显著增加（P<0.01）；而赤芍水提液对其增殖并不显著（P>0.05）。100~500μg/ml浓度的赤芍水提物与PDGF-BB病理模型组相比，细胞增殖有显著抑制（P<0.01）；而白芍水提液对其增殖并不明显（P>0.05）。结论白芍、赤芍水提物在化学成分上存在差异，并在细胞活性研究中，两者亦表现出不同的生物效应。
