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小檗碱对高糖培养的背根神经节中疼痛相关因子的影响
目的：探讨小檗碱对痛性糖尿病神经病变疼痛相关蛋白 P2X3、T RPV4、神经型一氧化氮合酶（nNOS ）表达的影响及意义。方法新生大鼠离体培养背根神经节神经元，免疫组织化学法、蛋白质印迹法检测细胞表达阳性率及蛋白表达。结果 P2X3、T RPV4、nNOS正常条件下在背根神经节中均有表达。免疫组织化学法检测高糖培养条件下 P2X3、T RPV4、nNOS可看到阳性表达神经元增多，受体表达升高。小檗碱处理后， P2X3、T RPV4、nNOS表达均下降。蛋白质印迹法检测结果显示高糖条件下 P2X3、nNOS表达高于对照组（ P＜0.01），小檗碱处理后，P2X3、TRPV4、nNOS均较高糖组降低（P＜0.01，P＜0.05，P＜0.01）。结论小檗碱可降低背根神经节神经元高糖环境下P2X3、TRPV4、nNOS的高表达，对糖尿病受损神经元有保护作用，可能为改善痛性糖尿病神经病变提供新途径。
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高糖环境下大鼠DRG神经元中PKCε和TRPV4mRNA的表达
目的 观察高糖环境对大鼠背根神经节(DRG)细胞瞬时感受器电位离子通道香草素受体4(TRPV4)、蛋白激酶Cε(PK Cε)mRNA表达的影响,明确高糖环境对以上2种受体的调控作用.方法 急性分离新生大鼠DRG细胞,培养48 h后更换培养液并分组.按照培养基含糖量不同分为:对照组(5.5 mmol/L,C组)、高糖1组(17.5 mmol/L,H1组)、高糖2组(35.0 mmol/L,H2组).换液后48 h提取细胞总RNA并进行逆转录.用RT-PCR及实时定量PCR检测TRPV4和PKCε mRNA表达的变化.结果 与对照组比较,PKCε mRNA在H1组表达没有明显变化(P＞0.05),而在H2组表达显著上调(P＜0.05).与对照组比较,TRPV4 mRNA在H1组表达显著上调(P＜0.05),而在H2组表达没有明显变化(P＞0.05).结论 高糖环境可以上调TRPV4/PKCε基因的表达,但是2种基因明显上调时糖浓度不一致,说明TRPV4的激活除了PKCε的调控外还受其它因素调节.
关键词： 瞬时感受器电位离子通道香草素受体4 蛋白激酶Cε 背根神经节 高糖环境
