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中药夏枯草抗结核活性成分研究
目的:从夏枯草分离得到单体中筛选出具有抗结核活性的成分.方法:被筛选13种单体化合物样本及阳性对照药(异烟肼),用DMSO配成母液,将配制好的培养基分装,巴氏灭菌法间歇灭菌,纯培养结核菌(H37Rv),培养30天后观察抑菌情况.结果:阴性对照管可见结核杆菌菌落,阳性对照未见菌落.结论:化合物β-香树脂醇(β-amyrin,xkc-04)、3,4-二-羟基苯甲酸甲酯(methyl 3,4-dihydroxybemoate,xkc-11)、对羟基苯甲酸(p-hydroxy-benzoic acid,xkc-13)对结核分枝杆菌细胞株有显著的抑制活性.
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海绵附生放线菌抗结核分枝杆菌活性物质的筛选及分离
目的 从海绵共附生的放线菌代谢物质中筛选出具有抗结核分枝杆菌活性的新型物质.方法 采用平板稀释法从南海海域采集的海绵中分离共附生放线菌菌株,使用微孔板稀释法评估放线菌代谢物抗结核分枝杆菌H37Rv能力.根据分子量和极性,使用高效液相色谱(HPLC)对初筛具有较高抑菌活性的菌株培养上清进行分离,并分别从分离各组分中进一步筛选、鉴定具有抑制结核杆菌生长作用的活性物质.提取该菌株的基因组DNA,采用通用引物对其16S rRNA行PCR扩增,并对扩增产物进行测序比对.结果 分离出的416株放线菌中,6株具有抗结核分枝杆菌功能,其中编号为NH128菌株的培养上清中含有抑制H37Rv生长的活性物质且作用较为明显;对其进行分离后的组分F3具有较高的抑菌活性;进一步通过HPLC和微孔板稀释法鉴定出,F3的亚组分S3含有高抑菌活性的物质,其MC50约为3 μg/mL.对NH128 16S rRNA序列比对结果显示,其与Aclinomycetales (R03 AY944262)同源性为99％.结论 南海海域海绵附生放线菌能够产生较高的抗结核分枝杆菌活性物质;NH128菌株可能为放线菌菌属Aclinomycetales(R03 AY944262)的变种.
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中国猕猴CD4+CD25+ 调节性T细胞抑制抗结核分枝杆菌特异性T淋巴细胞免疫反应
目的:体外观察中国猕猴CD4+CD25+ 调节性T细胞(Tregs) 对T淋巴细胞产生的抗PPD抗原特异性扩增的影响.方法:分离 6只3月内人工感染过结核分枝杆菌卡介苗的雄性中国猕猴外周血单个核细胞(PBMCs),免疫磁珠法分选纯化出Tregs,并用PKH26红标记.将去除Tregs的剩余PBMCs标记上CFSE,然后单独或与纯化的Tregs混合,分别给予结核杆菌纯化蛋白衍生物(PPD)或CD3/CD28 单克隆抗体刺激,体外培养7 d,用流式细胞术分析含或不含Tregs的PBMCs中CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞和Vγ2Vδ2 T淋巴细胞对PPD抗原和CD3/CD28抗体刺激的反应.结果:PPD不仅能引起CD4+ T淋巴细胞、CD8+ T淋巴细胞扩增,而且引起Vγ2Vδ2 T淋巴细胞也发生扩增.Tregs不仅能抑制 CD3/CD28 抗体诱导的CD4+ T淋巴细胞、CD8+ T淋巴细胞和Vγ2Vδ2 T淋巴细胞的抗原非特异性扩增,而且还可抑制PPD抗原刺激引起的CD4+ T淋巴细胞、CD8+ T淋巴细胞和Vγ2Vδ2 T淋巴细胞的抗原特异性扩增.结论:中国猕猴Tregs对T淋巴细胞产生的抗结核杆菌特异性免疫反应有负调节作用.
关键词： CD4+CD25+调节性T细胞 抗结核分枝杆菌 中国猕猴 -
抗结核分枝杆菌常用药治疗肺结核的药物动力学及药物毒性分析
目的：研究抗结核分枝杆菌常用药治疗肺结核的药物动力学特征及药物毒性。方法：对某院100例结核分枝杆菌菌株进行研究，分析左氧氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星的药物动力学，并对给药途径和给药种类产生的药物毒性和不良反应进行初步分析。结果：喹诺酮类药物片剂生物利用度95％～100％，平均血浆蛋白结合率25％，可经肾、肝排出，清除半衰期较长；左氧氟沙星静脉滴注给药共11例发生不良反应，显著高于环丙沙星（ P＞0．05）、氧氟沙星（ P＜0．05）；左氧氟沙星不良反应发生率为14．0％、环丙沙星4．0％、氧氟沙星5．0％，左氧氟沙星显著较高（P＜0．05）。结论：左氧氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星药物毒性轻微、安全性高，具体用药方案需结合患者自身实际，联合用药时需引起重视。
