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316L不锈钢经丝素肽/壳聚糖聚合物涂层后的血液相容性
背景: 选择组织相容性良好的聚合物材料作为心脏涂层支架的材料可以促进内皮细胞生长,抑制平滑肌细胞过度生长,减少局部炎症反应,有助于支架术后内皮损伤的早期修复,并减少支架局部血栓形成.目的: 实验拟观察316L不锈钢经丝素肽/壳聚糖聚合物涂层后的血液相容性.设计、时间及地点: 观察性实验,于2006-07/2007-07在中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所完成.材料: 医用316L不锈钢片为张家港先科医疗器械有限公司产品;丝素肽为中国科学院上海植物生态研究所产品;壳聚糖为浙江省玉环县海洋生物化学有限公司产品.方法: 通过静电自组装的方法,将丝素肽和壳聚糖涂在316L不锈钢表面形成聚合物膜.主要观察指标: 测定不锈钢涂层前后表面的动态凝血时间、扫描电镜观察涂层前后的不锈钢表面抗血小板作用、测定涂层不锈钢的溶血率.结果: ①不锈钢表面经过聚合物涂层后,凝血时间明显较未涂层的不锈钢时间延长.②裸316L不锈钢表面黏附的血小板数量较多,血小板变扁平,看不出明显的伪足状态,紧贴在材料的表面:丝素肽/壳聚糖聚合物不锈钢涂层表面也有一定数量的血小板黏附,血小板虽有伪足伸出,但是聚集密度和形态变化程度明显小于裸不锈钢表面黏附的血小板.③涂层不锈钢溶血率<5%,提示丝素肽,壳聚糖聚合物涂层不锈钢无溶血作用结论: 与裸316L不锈钢相比,丝素肽/壳聚糖聚合物涂层延长了动态凝血时间,减轻了血小板黏附和变形的程度,提高了316L不锈钢基体的血液相容性.
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丝素肽/壳聚糖聚合物涂层316L不锈钢的制备
背景:金属支架本身的致血栓性使对其进行表面改性研究极具应用意义.目的:利用层层静电自组装形成丝素肽壳聚糖聚合物膜.设计、时间及地点:材料改性体外实验,于2006-07/2007-07在中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所实验室完成.方法:通过层层静电自组装方法将丝素肽和壳聚糖交替涂层至医用316L不锈钢表面,对不锈钢表面进行改性.主要观察指标:应用扫描电镜观察涂层前后316L不锈钢表面形貌变化,通过傅里叶红外光谱分析涂层前后波谱变化,测定材料表面接触角分析涂层结果,并进行体外降解实验观察涂层的稳定性.结果:扫描电镜显示涂层后不锈钢表面均匀、致密;傅里叶变换红外光谱测定显示复合膜分子间存在强的离子键结合作用,也存在着强的氧键作用;接触角测定结果显示丝素肽和壳聚糖被交替涂层至不锈钢表面;体外降解实验证实了涂层不锈钢的降解过程相对稳定.结论:丝素肽与壳聚糖可通过静电自组装在不锈钢表面形成薄膜.
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丝素肽对过氧化氢致A549细胞损伤的修复作用
[目的]探究丝素肽(SF)对过氧化氢(H2O2)致人肺癌(A549)细胞损伤的修复作用. [方法]将细胞分为空白对照组,H2O2组(600 μmol/L),SF前处理组(10、20、30、50 mg/mL SF预孵育24h再加600 μmol/L H2O2损伤24h),SF后处理组(600 μmol/L H2O2损伤24h再加10、20、30、50 mg/mL SF孵育24h)及阳性对照前、后处理组[抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)].用MTT法测定细胞活力,生物化学法测定细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的含量和总抗氧化能力(T-AOC). [结果]H2O2组细胞活力为(46.67±2.19)％,MDA含量为(64.31±3.22) nmol/mg(以蛋白计).与H2O2组相比,前处理组和后处理组中细胞活力增加,而MDA含量降低(P＜0.05);SF后处理组细胞活力的增加和MDA含量的降低更明显(P＜0.05);尤其50 mg/mL SF后处理组比前处理组细胞活力增加值高2.33％,而MDA含量降低值少44.51 nmol/mg(以蛋白计).H2O2组中SOD、CAT活性和T-AOC都明显降低(P＜0.05),SF后处理明显提高SOD、CAT活性和T-AOC水平(P＜0.05). [结论]SF对H2O2致A549细胞损伤有修复作用,部分原因可能是由于其可增加细胞活力和提高细胞中抗氧化酶活性.
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丝素肽对Aβ25-35致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及机制研究
探讨丝素肽对Aβ25-35所致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其相关机制.建立Aβ25-35损伤SH-SY5Y细胞模型,并以丝素肽干预.MTT法检测丝素肽对Aβ25-35致SH-SY5Y细胞损伤的干预作用;Western blot检测丝素肽对Aβ25-35致神经元Tau蛋白多位点过度磷酸化的影响及其作用机制;DCFH-DA探针法检测丝素肽对Aβ25-35致SH-SY5Y细胞胞内活性氧(ROS)异常升高的影响.结果表明,丝素肽可改善Aβ25-35致SH-SY5Y细胞损伤.丝素肽可通过抑制GSK-3β活性、增强PP2A活性,改善Aβ25-35引起的神经元Tau蛋白异常磷酸化水平,提示丝素肽可通过调节Tau蛋白的磷酸化发挥神经保护作用.同时,丝素肽可降低Aβ25-35引起的SH-SY5Y细胞胞内升高的ROS水平,提示丝素肽还可通过调节氧化应激反应途径保护神经元.
