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壳聚糖支架复合重组人成骨蛋白1对体外培养兔髓核和纤维环细胞蛋白聚糖合成的影响
成骨蛋白1有效刺激软骨细胞蛋白聚糖和胶原蛋白合成已被证实,椎问盘内注射成骨蛋白1可增加椎间盘高度也在动物模型中得到证实.目的:体外评价重组人成骨蛋白1对培养于壳聚糖凝胶中的兔椎间盘细胞增殖和蛋向聚精合成的作用.设计、.时间及地点:成组设计,实验于2007-08/2008-02在北京军区总医院骨科实验室完成.材料:清洁级4月龄日本大耳兔5只.重组人成骨蛋白1为Sigma分装.医用级壳聚糖,脱乙酰度95.11%,黏度155 mPa·s.Mr870 000,由北京纵横洋洲医药生物科技有限公司提供.方法:无菌条件下取日本大耳兔椎间盘10个,分离其髓核和纤维环细胞并接种于自制壳聚糖凝胶支架,在培养液中加入重组人成骨蛋白1,并分为3组:对照组(无重组人成骨蚩白1)、100 μg/L重组人成骨蛋白1组、200 μg/L重组人成骨蛋白1组.主要观察指标:培养7,14,21 d时对培养物DNA含量、蛋白聚糖合成量(35SO42-摄入量、硫酸盐黏多糖含量)进行检测.结果:100,200 μg/L重组人成骨蛋白1组的DNA含量没有减少,对照组DNA含量逐渐F降.100,200 μg/L重组人成骨蛋白1组蛋白聚糖合成量明显高于对照组,200 μg/L重组人成骨蛋白1组升高更为显著.100,200 μg/L重组人成骨蛋白1组在3个时间点均呈现上升趋势,培养14 d和21 d的差异有显著性意义(P<0.001).结论:重组人成骨蛋白1可有效促进体外培养的兔髓核和纤维环细胞增殖及蛋白聚糖合成.
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椎间盘内注射生长分化因子5及成骨蛋白1对椎间盘退变影响的研究进展
目的 介绍生长分化因子5(growth differentiation factor 5,GDF-5)、成骨蛋白1(osteogenic protein 1,OP-1)在椎间盘退变中的研究进展及应用前景.方法 广泛查阅国内外近年相关文献,并行综合分析.结果 生长因子是治疗椎间盘退变潜力大的一类蛋白质.体外研究表明,外源性GDF-5显著增加髓核和纤维环细胞的脱氧核糖核酸酶和蛋白聚糖的含量,GDF-5(200 ng/mL)、OP-1明显刺激蛋白聚糖和胶原合成.体内研究表明,GDF-5(100ìg)、OP-1(100ìg混入10 ìL 5%乳糖中)椎间盘内注射能促进椎间隙高度的恢复,增加MRI评分,组织学分级有统计学意义.结论 重组人GDF-5、OP-1能有效刺激椎间盘细胞的新陈代谢、增加ECM合成,因此椎间盘内单一注射重组人GDF-5、OP-1对退变椎间盘具有可修复能力.单一外源性生长因子直接注射对延缓椎间盘退变显示出美好前景.
