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构建人头皮毛乳头细胞和真皮鞘细胞快捷高效分离培养的方法
目的:将显微法和两步酶法相结合,构建快捷分离培养纯的人头皮毛囊毛乳头细胞和真皮鞘细胞的方法.方法:从真皮-皮下组织交界处横断头皮,拔出脂肪组织中的完整毛囊,解剖显微镜下分离出毛乳头和真皮鞘,毛囊毛乳头用2 g/L胶原酶37℃孵育4 h左右后悬浮培养;真皮鞘碎片接种在涂有胶原的培养板中.培养的细胞用?-平滑肌肌动蛋白组化及碱性磷酸酶染色鉴定及鉴别.结果:获得纯化的毛乳头细胞和真皮鞘细胞.结论:将原有两方法结合后的新技术,既达到了快的目的,也解决了细胞纯度问题,是高效的人毛囊真皮成分细胞分离培养方法.
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影响毛囊器官型培养中胶原凝胶收缩的几个因素分析
目的:观察鼠尾胶原、毛乳头细胞和毛囊上皮细胞的浓度对毛囊器官型培养模型中胶原凝胶收缩的影响.方法:用不同浓度的鼠尾胶原、毛乳头细胞和毛囊上皮细胞制备成毛囊器官型培养模型,体外培养10 d,隔日测量培养凝胶的直径,观察其对胶原凝胶收缩的影响.结果:鼠尾胶原、毛乳头细胞和毛囊上皮细胞的浓度对毛囊器官型培养模型中胶原凝胶的收缩均有明显影响(P<0.01).鼠尾胶原的浓度越高,胶原凝胶的收缩程度越小;而毛乳头细胞和毛囊上皮细胞的浓度对胶原凝胶收缩的影响则恰好相反,浓度越高,胶原凝胶的收缩程度越大.结论:鼠尾胶原、毛乳头细胞和毛囊上皮细胞的浓度是影响毛囊器官型培养模型中胶原凝胶收缩的主要因素.
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毛囊细胞移植诱导裸鼠毛囊样结构形成的研究
目的:观察毛囊细胞移植诱导裸鼠毛发再生和毛囊重建情况.方法:采用细胞培养技术和裸鼠移植技术,将培养的毛囊毛乳头细胞、真皮鞘细胞和头皮真皮成纤维细胞按比例与毛囊上皮细胞混合,移植到裸鼠皮下,观察毛囊形成情况.结果:在毛囊毛乳头细胞与毛囊上皮细胞混合后移植到裸鼠皮下后可见毛囊样结构形成,而毛囊真皮鞘细胞和头皮成纤维细胞与毛囊上皮细胞混合则不能诱导裸鼠毛囊样结构形成.结论:低传代培养的毛乳头细胞与毛囊上皮细胞混合后在体内可诱导毛囊样结构形成.
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骨形成蛋白在毛囊中表达意义的研究进展(综述)
骨形成蛋白(BMP)与毛囊的形成和毛干的分化有重要的联系.在毛囊的不同周期,骨形成蛋白及其受体的时空表达较为复杂,意义不同,尤其休止期毛囊高度表达骨形成蛋白的意义还不清楚.对毛囊发育不同周期骨形成蛋白分子及其受体的表达方式和意义作一综述.
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皮肤毛囊研究进展
毛囊研究从19世纪初的毛发组织胚胎学一个小分支逐步发展成为现今一门日臻成熟的科学--毛囊生物学.该学科涉及的研究包括毛囊生长周期的调控、毛囊细胞生物学、毛囊模型研究、毛囊重建及组织工程研究等.随着生物工程技术和分子遗传学的迅猛发展,各相关学科对毛囊研究不断提出新的要求.它已不再仅仅局限于对毛囊及其模型进行体外生物学观察和研究,而是已经发展到对毛囊重建及皮肤组织工程等方面的研究领域.
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Williams E培养基中人游离毛囊器官培养的观测
目的 了解人头皮毛囊的组织结构特点、人毛囊体外再生能力和影响毛囊器官的生长增殖因素.方法 HE染色观察15例人头皮组织和人头皮毛囊的组织结构与形态特征.用WilliamsE培养基对150根人头皮毛囊进行体外培养,总结Williams E培养基中毛囊培养的规律与经验.结果 头皮中含有大量的毛囊、皮脂腺、汗腺等皮肤附属器官,毛囊上皮细胞丰富且分化程度较低,毛囊在头皮组织内生长方向规则.成功利用Williams E培养基进行人头皮毛囊体外培养,发现毛囊结构前5d的生长增殖速度快.比较其他培养基,使用无血清的Williams E培养基在毛囊体外培养中能取得较好的实验效果.结论 人头皮组织含有丰富的毛囊、皮脂腺、汗腺等皮肤附属器.无血清的Williams E培养基较其他培养基更有利于毛囊体外培养,使毛囊具备更好的体外再生能力,为毛发移植延迟手术创造了有利条件.
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毛乳头细胞的培养与鉴定
目的:建立毛乳头细胞的培养方法,以进一步研究毛乳头细胞在毛发再生中的作用和意义.方法:分离得到完整毛囊,依次采用Dispase酶和胶原酶消化得到毛乳头,再进行毛乳头细胞的培养.结果:成功进行了毛乳头细胞的原代和传代培养,所获细胞经细胞化学染色证实细胞具有明显的异染特性.毛乳头贴壁后5～6 d周围即可见细胞长出,细胞生长快,12～16 d左右细胞即可融合.在倒置显微镜下细胞呈成纤维细胞样,有聚集生长特性,至少可以传15代.冻存后复苏细胞贴壁率在80%以上.结论:该方法是体外培养毛乳头细胞的理想方法,操作较为简单,降低了工作强度,所获细胞纯度高,可以长期传代、冻存.
