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N-乙酰半胱氨酸对脑死亡巴马小型猪肝脏功能与核因子-KB mRNA及其蛋白表达的影响
目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetyleysteine，NAC)对脑死亡状态下巴马小型猪肝脏功能与NF-kB mRNA及其蛋白表达的影响.方法 将猪用随机数字表法分为3组,每组5只.应用改进的缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型.对照组(C组):仅行开颅及开关腹手术;非药物干预组(B组):不进行药物干预;NAC处理组(N组):于腩死亡后1,12 h按200 mg/ks的剂量将NAC加入100 ml等渗盐水中,经静脉缓慢滴注.脑死亡3,6,12,18,24 h取上腔静脉血检测谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)及IL-1β、IL-6、TNF-α的水平;在以上各时相点开腹取相同部位肝脏组织，光镜下观察肝脏组织结构变化,电镜下观察肝脏超微结构变化，免疫组化染色观察肝脏组织中NF-KB的表达水平,RT-PCR检测NF-KB mRNA的变化.结果 (1)与C组相比较,B组及N组ALT和AST水平自12 h开始逐渐升高，IL-1β、IL-6、TNF-α水平自3 h开始逐渐升高,NF-kB mRNA及其蛋白表达水平自6 h即开始逐渐升高,但N组升高幅度均显著低于B组,差异有统计学意义(P<0.05).(2)脑死亡后12 h可见肝细胞结构变化;N组肝脏结构损伤明显轻于B组.结论 NAC能够抑制脑死亡状态下NF-KB mRNA及其蛋白的表达,减少炎症介质的释放,从而保护脑死亡状态下肝脏的结构和功能.
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晚期糖基化终末产物对表皮角质形成细胞功能的影响及其机制
目的 研究晚期糖基化终末产物(AGEs)对表皮角质形成细胞(KCs)功能的影响及其生物学机制.方法 分离培养正常SD大鼠KCs,加入不同浓度AGEs干预48 h,选择细胞反应敏感,差异显著的100μg/ml AGEs干预组进行以下实验:用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法测定细胞增殖速度;检测KCs周期和凋亡,观察细胞核中NF-κB的活化状态;检测KCs迁移能力.结果 100μg/ml AGEs可以明显抑制KCs的增殖和分裂;诱导细胞进入早期凋亡状态;促进KCs迁移.抑制NF-kB的活性后,部分恢复细胞的增殖能力;逆转细胞的早期凋亡;使细胞的迁移能力趋于正常.结论 AGEs可以通过NF-kB途径影响KCs迁移、增殖和凋亡.
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雷公藤内酯：一种T-淋巴细胞核因子-кB的强效抑制剂
目的：探讨雷公藤内酯醇对T淋巴细胞中核因子-кB活力及其抑制分子IкBα的影响，以进一步阐明其免疫抑制效应的分子机制.方法：将不同浓度的雷公藤内酯醇处理普通培养状态的和同时使用PMA/PHA激活的Jurkat细胞，以凝胶迁移率实验(EMSA)检测细胞NF-кB活力的改变，并以逆转录-半定量PCR方法检测处理前后细胞中IкBα mRNA水平的改变.结果：(1)在普通培养状态下的Jurkat细胞中存在有一定活力的NF-кB，使用PMA/PHA处理可显著升高Jurkat细胞中NF-кB的活力，雷公藤内酯醇可以降低两种培养状况下的Jurkat细胞中NF-кB活力，并以激活状态下更为显著.(2)雷公藤内酯醇可以上调Jurkat细胞中IкBα mRNA的转录水平.结论：雷公藤内酯醇对T细胞内IкBα基因转录的调控以及抑制T细胞内NF-кB的活力是雷公藤免疫抑制效应的分子机制之一.
