首页 > 文献资料
-
低强度脉冲式超声对关节软骨的修复
背景：多种原因会导致关节软骨损伤的出现，常规治疗大多无法获得理想的效果。研究表明，低强度脉冲式超声在促进损伤关节软骨修复方面具有重要的作用。目的：进一步验证低强度脉冲式超声对关节软骨损伤的修复效果。方法：20只新西兰白兔均建立膝关节炎模型，随机分为2组，每组10只。观察组实施低强度脉冲式超声治疗；对照组予以假低强度脉冲式超声治疗。治疗后8周，收集两组取关节软骨组织，进行病理学观察和软骨组织学评分，观察软骨细胞超微结构和Ⅱ型胶原表达情况，并利用qRT-PCR法检测软骨细胞基质金属蛋白酶13表达情况。结果与结论：治疗8周后，①经甲苯胺蓝染色和病理学观察，对照组细胞排列紊乱，每层均可见软骨细胞减少以及簇集情况；观察组软骨细胞排列轻度异常，浅层细胞的出现减少以及簇集现象；②经软骨组织学评分：观察组各项评分均显著低于对照组(均P<0.05)；③超微结构：对照组软骨细胞较小，胞内线粒体、粗面内质网出现明显的扩张现象，胞浆肿胀，胶原原纤维粗大、高尔基体发达，核质碎裂。细胞器正常结构消失，细胞呈变性改变。观察组软骨细胞大小与高尔基复合体等细胞器均呈现出正常状态，胞内与膜周围均可观察到蛋白多糖颗粒；④基质金属蛋白酶13表达：观察组量显著低于对照组(P<0.05)；⑤免疫细胞化学染色：观察组Ⅱ型胶原阳性的棕黄色异染颗粒明显多于对照组；⑥不良反应：所有动物均未出现切口感染、化脓、红肿等情况。⑦结果表明，低强度脉冲式超声治疗关节软骨损伤可以延缓Ⅱ型胶原降解，抑制基质金属蛋白酶13的表达，获得理想的软骨修复效果。
-
低强度超声波对人骨髓间充质干细胞增殖的影响
目的 探讨低强度脉冲式超声波(LIPUS)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)体外培养增殖的影响及细胞周期蛋白(Cyclin) D1在LIPUS促进hBMSCs增殖中的作用机制.方法 以细胞浓度为2.0×104/ml接种于12孔培养板,分别采用辐射强度为0、30、40、50、60、80 mW/cm2的LIPUS每天刺激5 min,0、24、72、96 h后观察细胞形态学变化,用Scepter 2.0手持细胞计数器进行细胞计数,应用流式细胞仪检测细胞周期和增殖指数,细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活力,Western blot检测各强度组Cyclin D1表达水平,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各强度下Cyclin D1 mRNA的表达水平.结果 细胞计数发现,除30 mW/cm2(P=0.871)外,40 W/cm2(P=0.006)、50 W/cm2(P=0.001)、60 W/cm2(P=0.001)、80 W/cm2(P=0.004)组细胞数均高于对照组;细胞增殖活力检测发现,30 mW/cm2(P=0.042)、40 W/cm2(P=0.012)、50 W/cm2(P =0.001)、60 W/cm2(P=0.001)、80 W/cm2(P=0.046)组细胞增殖活力较对照组明显增高;细胞周期检测表明,LIPUS组细胞增殖指数显著高于对照组(P=0.001);Western blot和RT-PCR检测发现,与对照组比较,除30 mW/cm2(P=0.149)外,40 W/cm2(P=0.002)、50 W/cm2(P=0.004)、60 W/cm2(P=0.023)、80 W/cm2(P=0.012)组Cyclin D1的表达均上调;除30 mW/cm2(P=0.075)外LIPUS组Cyclin D1 mRNA表达上调,差异有统计学意义(P=0.001).结论 LIPUS能显著促进hBMSCs增殖,通过上调Cyclin D1的表达促进hBMSCs从G1期进入S期,从而促进其增殖.
