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老年性骨质疏松患者松质骨中骨形成蛋白-2及骨形成蛋白-7基因表达
目的通过观察老年性骨质疏松患者与正常人松质骨中骨形成蛋白(BMP)2、7mRNA含量的变化,探讨BMP基因表达在老年性骨质疏松症发病机制中的作用。方法共选8例临床病例,根据患者X线表现、桡骨远端骨密度值以及生化指标检测确定为老年性骨质疏松患者。对照组取8例年龄在20～30岁之间的骤然死亡的健康男性股骨头,取各自的股骨头提取RNA,以BMP2、7cDNA为探针进行RNA斑点杂交,根据图像分析结果进行统计处理,比较两组差异。结果临床患病组BMP2、BMP7mRNA含量明显低于对照组。结论老年性骨质疏松症患者松质骨中BMP2及BMP7mRNA表达明显降低,这可能是老年性骨质疏松症发病原因之一。
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Th1/Th2相关细胞因子基因检测方法的建立
目的:建立检测Th1/Th2相关细胞因子的方法.方法:设计6对用于IL-2、IL-4、IL-10、IL-13、IFNγ和β-actin 基因扩增的引物,建立可用于Th1/Th2相关细胞因子检测的RT-PCR技术,同时用切口平移法制备6种细胞因子的cDNA探针,建立RNA斑点杂交技术.结果:用RT-PCR和RNA斑点杂交技术检测20种肿瘤细胞株,发现11/20为Th2型细胞因子表达,8/20为Th0型,1/20未检测到细胞因子.结论:RT-PCR技术和RNA斑点杂交技术是检测Th1/Th2相关细胞因子的有效方法.
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人端粒酶RNA的cDNA探针制备及其对胃粘膜细胞端粒酶RNA表达的检测
目的建立人端粒酶RNA表达的检测方法.方法制备人端粒酶RNA,(human telomerase RNA,hTR)的cDNA探针,分别应用RNA斑点杂交与端粒重复序列扩增法(TRAP)分析检测不同胃粘膜的端粒酶RNA的表达与端粒酶活性.结果人端粒酶RNA的cDNA探针制备成功.18例活检胃癌组织及45例手术胃癌组织RNA斑点杂交检测的阳性率均为100%,相应TRAP分析的阳性率分别为88.89%、86.67%,低于RNA斑点杂交(P＜0.05).同时RNA斑点杂交结果提示在非癌胃组织中随着肠化程度增高人端粒酶RNA表达也增强.结论RNA斑点杂交检测人端粒酶RNA,具有高度的敏感性和特异性,弥补了TRAP分析敏感性不足的缺点.
