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肾上腺脑白质营养不良家系ABCD1基因突变研究
目的 分析肾上腺脑白质营养不良(adrenoleukodystrophy,ALD)家系的先证者及ALD携带者所孕育胎儿的ABCD1基因突变.方法 首先从RNA途径,应用RT-PCR技术,对2010年10月至2012年3月福建医科大学福总临床医学院5个家系先证者或其母亲的ABCD1基因编码区进行序列测定查找突变,再通过基因组DNA途径进行突变验证.产前诊断采用STR位点分析方法排除母体基因组DNA污染后,应用DNA测序或PCR-限制性酶切方法对5个胎儿的羊水基因组DNA进行突变分析.结果 在5个家系的先证者或先证者母亲分别发现5个不同位点的ABCD1基因突变,依次为c.796G＞A,c.521A＞G,c.1523C＞T,c.1534G＞A,c.1252C＞T.产前诊断结果显示:5个胎儿均为男性,胎儿1、2、3、4存在与先证者相同的突变,胎儿5未检测到与先证者5相同的突变.结论 ABCD1基因突变分析是ALD分子诊断及产前分子诊断准确、可靠的方法.
关键词： 肾上腺脑白质营养不良 分子诊断 产前分子诊断 ABCD1基因 基因突变 -
COL2A1基因突变所致先天性脊柱骨骺发育不良的产前分子诊断
目的 对COL2A1基因(typeⅡcollagen gene)G504S突变导致的先天性脊柱骨骺发育不良(SEDC)家系的2例中期妊娠患者进行产前分子诊断.方法 分别对患者于19+3孕周和18+6孕周进行羊膜囊穿刺术抽取羊水,提取羊水脱落细胞DNA,对COL2A1基因的第23外显子扩增,对其产物测序.同时第1例胎儿从17+3孕周-27+3孕周、第2例胎儿从16+1孕周-19+1孕周对股骨长度进行B超动态检测.结果 COL2A1的23外显子测序结果显示第1例胎儿带有与母亲同样的COL2A1基因G504S突变.第2例胎儿COL2A1基因无突变.B超的追踪检测显示2例胎儿颅骨双顶径都与孕龄相符.第1例患病胎儿股骨增长随孕龄的增加而逐渐减慢,但孕23周前减慢不十分明显.病例2的胎儿股骨长度与孕龄相符,现继续妊娠观察.于第27+5孕周对第1例患病胎儿行引产术后,影像学检测显示胎儿脊柱扁平、长骨明显短小,证实胎儿患有SEDC.结论 对于有SEDC风险的胎儿进行基因检测非常重要,可以在B超诊断前了解胎儿基因型并明确诊断.B超对胎儿股骨长度的动态检测有助于SEDC的诊断.
关键词： COL2A1基因 先天性脊柱骨骺发育不良 产前分子诊断 -
三个肾上腺脑白质营养不良家系的产前分子诊断
目的 对3名来自不同家系的肾上腺脑白质营养不良(ALD)携带者所怀胎儿进行产前分子诊断.方法 在采用STR位点分析方法排除母体基因组DNA污染后,分别应用变性高效液相色谱和DNA测序方法对3个胎儿的羊水基因组DNA进行分析.结果 胎儿1和携带者1的分析结果完全一样,均出现洗脱双峰,并经DNA测序证实,该胎儿为S108X突变携带者;胎儿2、胎儿3和正常对照一致,均为洗脱单峰,经DNA测序证实,这两个胎儿的基因组DNA上均不存在基因突变(R617C突变和1801-02 delAG突变).结论 胎儿1带S108x突变,为ALD携带者;胎儿2不带R617C突变,为正常纯合子;胎儿3不带1801-02 del AG突变,为正常半合子.
关键词： 肾上腺脑白质营养不良 产前分子诊断 ABCDl基因 基因突变 变性高效液相色谱 -
肾上腺脑白质营养不良的产前分子诊断
目的对2名来自不同家系的肾上腺脑白质营养不良携带者所怀胎儿进行产前分子诊断.方法在采用STR位点分析方法排除母体基因组DNA污染后,应用扩增阻滞突变系统和DNA斑点杂交的方法对胎儿1羊水基因组DNA进行检测,应用PCR-RFLP和DNA序列测定对胎儿2羊水基因组DNA进行分析.结果在针对R617G突变的扩增阻滞突变系统中,当使用突变引物时,从胎儿1羊水DNA、胎儿1母亲基因组DNA均扩增出185bp的预期特异性条带,而胎儿1父亲和对照则未扩出.在斑点杂交反应中,应用R617G突变型探针时,只有胎儿1羊水细胞及其母亲外周血基因组DNA出现特异性显色斑点.在第2个家系中,先用PCR扩增出横跨P534R突变位点的基因组DNA片段(506bp),应用HaeⅡ酶切此产物,胎儿2以及其父亲、无关对照均未见切割,其母亲的部分产物被切割成396bp和110bp两个片段.对此PCR产物进行DNA序列测定,未在胎儿2中检测出P534R突变.结论 胎儿1带R617G突变,为肾上腺脑白质营养不良半合子;胎儿2不带P534R突变,为正常半合子.
关键词： 肾上腺脑白质营养不良 产前分子诊断 ABCD1基因 基因突变 ABCD1蛋白
