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IL-1β对肠上皮细胞屏障通透性的影响
目的 炎症性肠病是儿童和青少年时期重要的慢性胃肠道疾病,肠黏膜屏障的损伤在其发病中起重要作用.本研究通过IL-β刺激Caco-2细胞单层,体外模拟炎症性肠上皮细胞屏障,为研究炎症性肠病的发病及治疗提供基础.方法 体外培养Caco-2细胞21d模拟肠上皮细胞单层屏障.炎症1组从培养第5天开始每隔1天应用IL-1β处理2h检测TEER值,至第21天.炎症2组于培养第18天换用含IL-1β培养液,分别于处理0、12、24、48、72 h检测TEER.正常对照组用普通培养液培养,也于相应时间点检测TEER.结果 正常对照组细胞TEER从第5天至第15天逐渐增加,在第15天达到600 Ω·cm2,并到达平台期保持至第21 d.炎症1组细胞TEER值均低于正常组细胞,并且直至第21天仍＜500 Ω·cm2.炎症2组细胞显示时间依赖性的TEER逐渐降低,在48 h达到大值,然后在72 h轻度回升.结论 培养2～3周的Caco-2细胞能够形成具有极性的肠上皮细胞单层,对其给予IL-1β刺激可在体外模拟炎症性肠上皮细胞屏障.
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豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的跨内皮细胞电阻及对牛血清白蛋白的通透性
目的:研究豚鼠耳蜗微血管内皮细胞跨细胞电阻的动态变化及峰值大小,以及细胞单层对125Ⅰ-牛血清白蛋白的通透性.方法:①用小池技术建立起该内皮细胞通透性的体外模型;②研究该体外模型跨细胞电阻及对125Ⅰ-牛血清白蛋白的通透性.结果:①耳蜗内皮细胞在培养增殖过程中其跨细胞电阻呈动态变化过程,以5×104/cm2的细胞密度接种时,7 d左右电阻到达峰值,其跨细胞电阻峰值大小为(118.9±18.5)Ω/cm2;②体外模型中加入125Ⅰ-牛血清白蛋白后,贝克-时间变化图呈抛物线型上升曲线,90 min内几乎呈直线.结论:跨细胞电阻及对125Ⅰ-牛血清白蛋白变化曲线反映了体外耳蜗微血管内皮细胞的通透性特征.
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葡萄糖PDS对单层人腹膜间皮跨细胞电阻及迁移修复能力的影响
目的:观察不同浓度葡萄糖PDS(PDS)对单层人腹膜间皮细胞(HPMCs)跨细胞电阻(TER)以及迁移修复能力的影响.方法:用不同葡萄糖浓度PDS(1.5%,2.5%,4.25%)分别与DMEM以1∶1比例混合后体外培养HPMCs.四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖.使用双池培养皿(transwell)构建HPMCs单层细胞模型.采用TER技术测定PDS对HPMCs通透性的影响.划痕损伤实验观察葡萄糖对HPMCs修复再生能力的影响.结果:不同浓度葡萄糖PDS(1.5%,2.5%,4.25%)干预均可明显地抑制HPMCs的增殖(P＜0.05).TER值随PDS干预时间的延长而逐渐下降,且与葡萄糖浓度呈负相关(P＜0.01).葡萄糖PDS可明显抑制HPMCs迁移修复能力,且与葡萄糖浓度相关.结论:高糖PDS液抑制细胞增殖,降低单层HPMCs的TER值,并抑制HPMCs损伤后迁移修复能力.提示PDS中高糖成分是导致腹透患者腹膜高通透性和超滤衰竭的重要因素.
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豚鼠耳蜗微血管内皮细胞体外通透性的研究
目的研究豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的体外通透性特征.方法在成功建立豚鼠耳蜗微血管内皮细胞体外通透性模型的基础上,研究该体外模型跨细胞电阻及对125I-牛血清白蛋白的通透性. 结果①耳蜗微血管内皮细胞在培养增殖过程中其跨细胞电阻呈动态变化过程,以5×104/cm2 的细胞密度接种时,7 d左右电阻到达峰值,其跨细胞电阻峰值大小为(118.9±18.5)Ω/cm2 ;②体外模型中加入125I-牛血清白蛋白后,其通透性呈上升期抛物线型曲线, 90 min内几乎呈直线.结论跨细胞电阻及对125I-牛血清白蛋白变化曲线能反映体外耳蜗微血管内皮细胞的通透性特征.
