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核因子κB受体活化因子配基在人继承恒牙缺失的滞留乳牙及乳牙根生理性吸收不同时期表达研究
目的 研究核因子κB受体活化因子配基(RANKL)在人继承恒牙缺失滞留乳牙及乳牙根生理性吸收不同时期的表达.方法 选取2010年6-12月沈阳市口腔医院正畸科及儿童牙病科10～15岁患者因治疗需要拔除的乳牙18颗,按牙根吸收长度不同分为牙根吸收早、中、晚期(早期组、中期组、晚期组),各6颗.同时选取无恒牙胚滞留乳牙(滞留组)和正畸拔除的正常恒牙(对照组)各6颗.采用免疫组化方法检测RANKL蛋白的表达,并测定累积光密度值.结果 牙髓成纤维细胞:对照组RANKL累积光密度值明显低于其余组(均P＜0.01)；早期组、中期组明显低于晚期组(均P＜ 0.01).成牙本质细胞:对照组RANKL累积光密度值亦明显低于其余组(均P＜0.01)；早期组、中期组、晚期组三者间差异均有统计学意义(P＜0.01).破牙细胞:对照组未见破牙细胞；早期组、中期组与晚期组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 RANKL是引起乳牙牙根缓慢吸收的因素之一.
关键词： 成牙本质细胞 核因子κB受体活化因子配基 滞留乳牙 生理性根吸收 -
家兔乳恒磨牙齿式及下颌乳磨牙牙根吸收规律的观察
目的:为探讨乳牙生理性根吸收机制提供理想的实验动物资料.方法:观察日龄0、4、10、16及22 d家兔下颌齿式,拍X线片,并苏木精-伊红染色,观察根吸收情况.结果:家兔上下颌单侧各有3颗及2颗乳磨牙,磨牙单侧均为3颗.下颌第二乳磨牙牙根于第4天已开始吸收,分别于10 d、16 d吸收了约1/3、2/3,22 d左右时脱落,下方恒牙开始萌出.结论:本实验证实家兔为双生齿类,替换周期短,为经济适用的研究乳牙生理性根吸收及乳恒牙替换的实验动物.
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不同根吸收阶段乳牙牙周膜干细胞生物学特性研究
目的：比较生理性根吸收不同阶段的乳牙牙周膜干细胞（PDLSCs）的生物学特性，检测其对破骨细胞形成和凋亡相关分子的表达情况，为解释生理性根吸收的调控机制提供实验依据。方法：通过分离、培养处于不同生理性根吸收时期的乳牙PDLSCs（未吸收、中度吸收、重度吸收）与恒牙PDLSCs；采用流式细胞术、MTT实验比较各组PDLSCs的免疫表型、细胞增殖能力；采用成骨、成脂诱导与茜素红染色、油红O染色及Real-time PCR检测各期PDLSCs成骨成脂相关基因表达；采用Western blot检测各组PDLSCs的RANKL、OPG与FasL表达。结果：所分离获得各组乳牙PDLSCs表达间充质干细胞标志分子，与恒牙PDLSCs相比具有较强的增殖能力。其中，重度吸收组乳牙PDLSCs与其它组相比成骨能力强、成脂能力差。不同根吸收时期的PDLSCs差异表达RANKL、OPG与FasL蛋白。结论：不同根吸收时期乳牙PDLSCs生物学特性存在差异，RANKL、OPG与FasL的差异表达可能对生理性根吸收过程中破骨细胞的形成与凋亡起到调控作用。
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人脱落乳牙牙髓干细胞与人恒牙牙髓干细胞成骨分化及破骨能力的差异
目的 比较处于生理性根吸收时期的自然脱落乳牙牙髓干细胞(SHED)和恒牙牙髓干细胞(DPSCs)的成骨分化及破骨能力,探讨两者在成骨和破骨相关分子的表达情况.方法 体外分离、培养和纯化处于生理性根吸收时期的自然脱落乳牙牙髓干细胞与恒牙牙髓干细胞;两种干细胞在成骨诱导14d和21 d,分别进行ALP染色、茜素红染色,并通过Real-time PCR检测SHED和DPSCs矿化诱导后的成骨与破骨相关基因表达.结果 倒置显微镜下观察,SHED和DPSCs形态均为长梭形;两种干细胞经矿化诱导后,茜素红染色可见SHED的矿化结节计数多于DPSCs(P＜0.05),SHED的ALP活性亦强于DPSCs(P＜0.05).RT-PCR检测结果显示,经矿化诱导后两种干细胞均表达成骨与破骨相关基因Runx2、OCN、ALP、OPG和RANKL,但DPSCs的Runx2、OCN和ALP的表达水平均低于SHED (P＜0.05),且SHED反应细胞破骨/成骨能力的RANKL/OPG的比值显著高于DPSCs(P＜0.05).结论 与DPSCs相比,SHED不仅具有较强的成骨分化能力,还兼有较强的破骨能力,为SHED参与生理性根吸收骨改建的调控机制提供实验依据.
关键词： 生理性根吸收 人脱落乳牙牙髓干细胞 恒牙牙髓干细胞 成骨分化 破骨细胞 -
乳牙生理性根吸收机制的研究进展
乳牙生理性根吸收是导致乳牙脱落的一种特有的生理性现象.为研究其分子机制,国内外学者进行了大量试验,结果显示核因子-kB受体活化因子及其配体和骨保护蛋白及白细胞介素等因子在这一过程中起到了重要的作用.下面就乳牙生理性根吸收的特点和分类、破牙细胞对乳牙生理性根吸收的作用和展望等作一综述.
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继承恒牙胚与乳牙生理性根吸收的关系
恒牙胚是引起乳牙生理性根吸收的重要因素,但却非唯一的因素.恒牙胚缺失的乳牙也会发生根吸收,导致乳牙脱落.下面就破牙细胞及其相关信号通路、继承恒牙胚对乳牙根吸收的影响和继承恒牙胚缺失下的乳牙根吸收作一综述.
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乳牙根生理性吸收机制的研究进展
乳牙根的生理性吸收过程中既有牙槽骨、牙本质等的组织学改变,也有破骨细胞、破牙细胞等的细胞学改变,同时还有多种细胞因子的参与.继承恒牙的牙囊和星网状层似乎在乳牙丰根的吸收中起着重要作用,而继承恒牙先天性缺失的乳牙根吸收终仍会发生,其机制目前尚不明了.下面从细胞及其分子水平就乳牙根生理性吸收机制的研究进展作一综述.
关键词： 乳牙 生理性根吸收 破牙细胞 核因子-κB受体活化剂配体 -
生理性根吸收过程中乳牙牙髓干细胞通过α7nAChR调节破骨细胞分化能力的研究
目的:探讨生理性根吸收过程中乳牙牙髓干细胞(DDPSCs)通过α7亚型烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)对破骨分化能力的调节作用.方法:酶消化法和有限稀释法分离培养根吸收不同时期DDPSCs和恒牙牙髓干细胞(DPSCs).采用实时定量PCR和Western blot,检测各组细胞α7nAChR、RANKL、OPG的表达及其比值差异,以及阻断α7nAChR后RANKL、OPG的表达及其比值变化.结果:α7nAChR表达及RANKL/OPG比值在根吸收中期DDPSCs中明显升高(P＜0.05).阻断α7nAChR后,RANKL/OPG明显下降(P＜0.05).结论:在乳牙生理性根吸收过程中,α7nAChR通过上调自身表达,参与对RANKL/OPG的调节,影响DDPSCs的破骨分化能力.
关键词： 生理性根吸收 乳牙牙髓干细胞 烟碱型乙酰胆碱受体α7亚型 -
内源性配体 SLURP1经α7亚型烟碱型乙酰胆碱受体介导调控乳牙牙髓干细胞破骨能力的研究
目的：初步探讨α7亚型烟碱型乙酰胆碱受体（α7 nAChR）及其内源性配体 SLURP1在乳牙生理性根吸收过程中调控破骨细胞分化成熟的可能作用。方法：分离培养并优选乳牙生理性根吸收不同时期乳牙牙髓干细胞（SHEDs）及恒牙牙髓干细胞（DPSCs），经检测鉴定后，分别采用实时定量 PCR、免疫荧光染色及半定量光密度分析技术检测各组细胞中α7 nAChR 基因及蛋白的表达差异；实时定量 PCR 检测各组细胞中SLURP1、经典成骨／破骨相关因子 RANKL、OPG 基因的表达差异，并进行统计学分析。结果：乳牙牙根吸收中期及晚期的 SHEDs 中α7 nAChR 基因和蛋白的表达水平显著高于乳牙牙根稳定期 SHEDs 与恒牙 DPSCs （P ＜0．05）；SLURP1基因表达水平以乳牙牙根吸收中期高，晚期次之，恒牙再次之，乳牙牙根稳定期低，各组间 P ＜0．05。RANKL／OPG 比值与 SLURP1基因表达趋势一致（P ＜0．05）。结论：SLURP1与乳牙牙髓干细胞膜上的α7 nAChR 结合后，可通过调节 RANKL／OPG 的表达比例而影响乳牙牙髓干细胞的破骨能力。
