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oxHDL3、oxLDL诱导THP-1单核源性巨噬细胞表达IL-1β、IL-6、HLA-DR、CD86
目的:动脉粥样硬化是一种慢性免疫炎症性疾病,其脆性斑块的两个主要特征是含有大量的炎症免疫介质和巨噬细胞.oxHDL和 oxLDL被发现存在于粥样斑块内,探索、比较其对炎症免疫介质产生的影响有助于进一步阐明As发生发展的机制.方法:用RT-PCR和流式细胞术等方法观察oxHDL3和oxLDL对THP-1单核源性巨噬细胞表达4种动脉粥样硬化相关基因(炎症免疫反应相关)IL-1β、IL-6、CD86、HLA-DR的影响.结果:THP-1单核源性巨噬细胞经oxHDL3和oxLDL处理后,IL-1β、IL-6的mRNA水平明显上调,CD86、HLA-DR的表面表达增强,CD86+、HLA-DR+细胞的百分比显著提高.而天然HDL3和LDL不具有上述效应.结论:oxHDL3和oxLDL经诱导或增强巨噬细胞表达IL-1β、IL-6、CD86和HLA-DR,可能参与动脉粥样硬化病变的形成与发展.
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pCDNA 3.1/EC-SOD真核载体的构建及在巨噬细胞中的表达
目的为明确EC-SOD在动脉粥样硬化发生发展中的作用,课题组体外构建pCDNA 3.1/EC-SOD真核表达载体,并观察其在THP-1单核源性巨噬细胞中的表达情况。方法重组质粒经PCR、酶切以及序列分析正确无误后,借助Lipofectamine 2000将转染到THP-1单核源性巨噬细胞中,24h后倒置荧光显微镜下观察转染情况。结果重组质粒经酶切鉴定、PCR和测序分析后,证实pCDNA 3.1/EC-SOD质粒构建成功。将pCDNA 3.1/EC-SOD通过脂质体转入THP-1单核源性巨噬细胞后,倒置荧光显微镜下观察转染效率。结论 pCDNA 3.1/EC-SOD载体构建成功,并成功在THP-1单核源性巨噬细胞中表达,为研究EC-SOD在动脉粥样硬化发生发展中的作用奠定了基础。
关键词： EC-SOD THP-1单核源性巨噬细胞
