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  • 小鼠pIV启动子调控CⅡTA突变体重组腺病毒表达选择性抑制MHCⅡ类分子的表达

    作者:龙宪连;管政;张军;方超平;张薇薇;张倩;沈茜

    目的:观察受CⅡTA-pIV启动子驱动的MHCⅡ类分子反式激活因子突变体(CⅡTAm)重组腺病毒对MHC Ⅱ类分子表达的选择性抑制作用,并探讨其相关机制.方法:构建了N-端酸性氨基酸区缺失了118aa的CⅡTA突变体及其CⅡTA-pIV启动子驱动的重组腺病毒Ad-pIV-CⅡTAm,将Ad-pⅣ-CⅡTAm或对照腺病毒Ad-GFP感染小鼠内皮细胞株SVEC细胞和转染巨噬细胞株J774细胞,并以IFN-γ刺激.用RT-PCR检测野生型和突变型CⅡTA mRNA的表达,用流式细胞术检测MHCⅡ类分子在细胞表面的表达.结果:成功构建CⅡTA-pⅣ启动子调控下的CⅡTA突变体基因重组腺病毒表达载体Ad-pⅣ-CⅡTAm:该腺病毒介导的CⅡTA突变体mRNA在SVEC和1774细胞内的表达受到IFN-γ的上调,同时抑制这些细胞上诱导型和组成型MHCⅡ类分子的表达.结论:Ad-pⅣ-CⅡTAm重组腺病毒是一种IFN-γ调控型表达载体,可有效地抑制受感染细胞上MHCⅡ类分子的表达.

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