首页 > 文献资料
-
M1与7TD1细胞中IL-6激活核因子的比较
目的:探讨IL-6在不同靶细胞中引起不同生物学效应的分子基础.方法:检测IL-6对M1与7TD1细胞生长及分化的影响,通过凝胶阻滞电脉(EMSA)比较IL-6在M1与7TD1细胞中激活STAT3(代表JAK-STATs通路)和NF-IL6(代表P21ras/MAPK/NF-IL6通路)的情况.结果:IL-6诱导M1细胞生长停止并向巨噬细胞方向分化,却促进7TD1细胞生长.在这两种细胞中,低剂量IL-6均可激活STAT3,但M1细胞中STAT3的激活是持续性的,7TD1细胞中STAT3的激活是一过性的;而IL-6在7TD1细胞中激活NF-IL6所需的剂量(0.1ng/ml)远低于在M1细胞中所需的剂量(100.0ng/ml),不过活化的NF-IL6在两种细胞中持续的时间均超过60min.结论:JAK-STATs通路与P21ras/MAPK/NF-IL6通路可能分别代表生长抑制信号与生长促进信号.
-
鼠NF～IL～6反义真核表达载体的构建和鉴定
目的 构建包含鼠细胞转录因子白介素6 (NF-IL6)反义基因的部分功能区的重组反义真核表达载体pcDNA3.0/ NF-IL6,为进一步研究鼠巨噬细胞中NF-II6的功能奠定基础.方法 Trizol试剂法提取体外分离培养的鼠巨噬细胞总RNA,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增NF-IL6基因目的 片段,PCR产物及真核表达载体pcDNA3.0分别双酶切并进行连接,转化入大肠杆菌Ecoli Dh5α扩增后获得重组载体.结果 RT-PCR获得预期大小的特异性NF-IL6DNA片段,经PCR、双酶切及测序分析证实已将鼠NF-1L6 cDNA片段正确的反向插入真核表达载体中.结论 成功获得反义pcDNA3.0/ NF- IL6重组质粒.
