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人心肌肌钙蛋白 I(cTn I)文献资料
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人心肌肌钙蛋白I鲁米诺化学发光酶免疫分析法的建立
目的:制备两株抗人心肌肌钙蛋白 I(human cardiac troponin I,cTn I)单克隆抗体,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法.方法:制备腹水型单抗、饱和硫酸铵沉淀法和亲和层析柱Protein G纯化抗体,并通过SDS-PAGE和ELISA对抗体特异性进行鉴定,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法,并对30份临床血清样本进行检测.结果:本实验制备的两株单抗(分别命名为Ab1、Ab3;亚型都是IgG1)能够识别以cTn I单体、cTn I-C复合物和cTn I-T-C复合物不同形式存在的cTn I.Ab1、Ab3的效价分别为1:80万和1:40万,亲和力常数分别为1.62×109L/mol、2.60×108L/mol.利用2株单抗建立的鲁米诺化学发光酶免疫分析法检测范围为:6.25 ~400 ng/ml.对30份临床样本进行检测,阳性检出率为77.3%,阴性检出率为100%.结论:建立了可以检测以cTn I单体、cTn I-C和cTn I-T-C复合物形式存在的cTn I的鲁米诺化学发光酶免疫分析法,具有更高的实用性.
关键词: 人心肌肌钙蛋白 I(cTn I) 单克隆抗体 化学发光