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TNFAIP8干扰质粒的构建及佳干扰效率质粒的筛选
目的：构建并筛选出干扰效率佳的TNFAIP8-shRNA-pSIREN-RetroQ干扰质粒。方法：通过生物软件选择3个TNFAIP8基因干扰位点，构建干扰质粒并测序验证，将干扰质粒及对照质粒分别转染至 A549细胞，通过RT-PCR、Western blot检测干扰效率。结果：经RT-PCR和Western－Blot证实TNFAIP8-shRNA-pSIREN-RetroQ干扰质粒能有效干扰并抑制细胞内TNFAIP8基因的表达，通过流式检测发现降低TNVAIP8表达可以提高细胞对aDR5 ScFv诱导凋亡的敏感性。结论：成功构建和设计了对TNFAIP8基因具有显著干扰效率的干扰质粒，为进一步研究TNFAIP8基因的功能奠定了基础。
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TNFAIP8与胃癌耐药关系的初步研究
目的：：探讨TNFAIP8与胃癌耐药性的关系。方法：选取47例进行新辅助化疗患者手术前后的标本,免疫组化检测TNFAIP8蛋白的表达；Western blot检测胃癌细胞株SGC-7901及其顺铂耐药细胞株SGC7901/DDP中TNFAIP8蛋白表达差异,利用RNA干扰技术降低顺铂耐药细胞株中TNFAIP8的蛋白表达后,MTT检测其对顺铂的敏感性有无变化。结果：TNFAIP8在新辅助化疗前后的表达差异不大,在新辅助化疗无效组中的表达较有效组高( P<0.05)；SGC7901/DDP细胞中TNFAIP8蛋白的表达高于SGC7901细胞,siRNA-TNFAIP8质粒转染SGC7901/DDP细胞后蛋白表达显著下降,MTT结果显示降低TNFAIP8蛋白表达,细胞对顺铂的IC50较SGC7901/DDP显著下降( P<0.05),敏感性提高。结论：TNFAIP8参与了胃癌的化疗耐药性。
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TNFAIP8在胃癌组织中表达的研究和临床意义
目的 通过检测胃癌组织中肿瘤坏死因子α诱导蛋白8 (TNFAIP8)的表达,探讨其与胃癌临床病理参数的关系及与胃癌发生发展的关系,揭示胃癌的发病机制.方法 采用免疫组化SP法,检测50例胃癌以及50例正常胃粘膜中TNFAIP8的表达.结果 50例正常胃粘膜组织中TNFAIP8无表达,而在50例胃癌组织中TNFAIP8阳性表达13例,TNFAIP8阳性率为26％.低分化胃癌组TNFAIP8阳性表达率明显高于中分化腺癌组(P＜0.05)；Ⅲ期胃癌组TNFAIP8阳性表达率明显高于Ⅱ期胃癌组(P＜o.05)；有淋巴结转移组TNFAIP8阳性表达明显高于无淋巴结转移组；TNFAIP8在不同性别和年龄的胃癌组织中无差异.结论 TNFAIP8的表达与患者的性别和年龄无关,而与胃癌的组织学分级、胃癌的TNM分期和淋巴结转移有相关性.TNFAIP8在胃癌组织中表达率较正常胃粘膜升高,差异有统计学意义(P＜0.05),提示TNFAIP8可能参与了胃癌的发生、发展.
