您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
嵌合肽免疫原文献资料
-
HCG嵌合肽CP12基因的构建和原核系统表达
发展可组合靶抗原多个线性B细胞表位和自身或外源T细胞表位的基因工程嵌合肽免疫原,是当今疫苗学和免疫学界又一新的研究方向[1-3].我们曾以克服hCG避孕疫苗研制中存在的佐剂和免疫应答的MHC遗传限制等突出问题为目标,报道了hCG嵌合肽CP1编码基因的合成和原核生物表达的阶段性实验结果[4]. 本研究是系列基因工程hCG嵌合肽疫苗研究项目内容之一.其目的是,一在DNA和蛋白质分子设计水平积累提高靶CP肽在大肠杆菌中表达率的经验,二分析探讨所设计的不同表位组合顺序和CP肽链长度对其免疫原性的影响. CP12的分子设计与CP1的相似,即以同样顺序组合了hCGβ的3个线性B细胞表位和6个Th细胞表位(其中2个是广谱性的),区别是CP12在CP1的N端接上一段无B-和T-细胞表位的肽段, 它出自能在大肠杆菌中高表达的与人透明带1(ZP1)高度同源的猪ZP4肽的N端.CP12编码基因的构建分二步走,也就是,先化学合成正负链四段猪ZP4 25聚肽编码基因(含CP1编码基因5'端ATG后至BamH I位点间的短片段),两两配对退火复性后,通过酶促反应连接成1个ZP肽编码基因片段.然后再借助其两端EcoR I和BamH I酶切位点,重组插入经上述2种酶双酶切的pBV2 21-CP1重组表达质粒.DNA测序验证了CP12全序列.
