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腺激肽释放酶2酶联免疫定量分析法的建立及其方法学研究
目的:建立高灵敏度和特异性的腺激肽释放酶2(hk2)酶联免疫吸附试验(ELISA).方法:以hk2单克隆抗体(hk2 mAb)为包被抗体,hk2多克隆抗体(hk2pAb)和辣根过氧化酶(HRP)标记抗IgG为检测抗体,建立检测hk2双抗体夹心ELISA法,并对其灵敏度、精密度、准确度和稳定性等方法学进行评价.结果:hk2 mAb、hk2 pAb和HRP标记IgG的佳稀释工作浓度分别为1:100、1:2 000 和1:8 000.该法线性范围为50～800 ng/L、线性良好(R2=0.99)、灵敏度为28 ng/L、批内和批间CV分别为5.78%和7.56%、平均回收率为99.4%.结论:双抗体夹心ELISA 法检测人血清hk2,其敏感性高、特异性强、准确度好,可满足人血清和组织细胞培养液中hk2水平的检测.
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前列腺癌患者血清腺激肽释放酶2检测的临床意义
[目的]探讨前列腺癌(PCa)患者血清腺激肽释放酶2(human kallikrein 2,hK2)检测的临床意义.[方法]采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和放射免疫分析法(RIA)分别检测30例PCa、30例前列腺增生(BPH)患者和30名健康人血清hK2和前列腺特异性抗原(PSA)的水平.并随访12例行根治性前列腺全切术后PCa患者hK2水平.[结果]PCa组hK2水平为78.8±25.2ng/L,明显高于BPH组(25.4±6.28ng/L)和健康组(24.1±4.16ng/L),差异有统计学意义(P＜0.001);BPH组与健康组比较差异无统计学意义(P＞0.05);hK2检测PCa的敏感度、特异性、准确率分别为63.3％,90.0％,76.6％;血清hK2诊断PCa的ROC曲线下面积为0.767 (95％CI:0.642～0.891);12例PCa患者手术前和手术后hK2比较差异有统计学意义(81.5±24.8ng/L vs 38.4±13.5ng/L,P＜0.001).[结论]血清hk2诊断PCa,可能可以提高其特异性,减少不必要的活检率,有望成为新的PCa检测指标预测高危人群.
