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  • TLR2/4在 MTB Hsp16.3刺激小鼠巨噬细胞过程中表达及作用的初步探讨

    作者:李姗姗;秦欢;刘芊伊;徐林;张继东;冯继红;李龙梅;泮红飞;罗军敏

    目的::在体外细胞水平,初步探讨TLR2/4在MTB Hsp16.3刺激小鼠骨髓来源巨噬细胞的表达及作用。方法:从BALB/c小鼠的胫腓骨中取骨髓细胞,与GM-CSF共培养获得骨髓来源的M0型巨噬细胞,流式检测F4/80和CD11b的表达并观察其形态;100 ng/ml MTB Hsp16.3刺激M0巨噬细胞,分别培养0、12、24、36、48、72 h,Real-time PCR检测不同时间点TLR2/4的表达水平;利用RNAi干扰技术沉默巨噬细胞表面的TLR2/4受体,MTB Hsp16.3刺激沉默TLR2/4的M0巨噬细胞,分别培养0、12、24、36、48、72 h,Real-time PCR检测不同时间点TLR2/4及Ym-1、Fizz1、IL-10、TNF-α、iNOS、TGF-β细胞因子的表达水平。结果:M0型巨噬细胞在 MTB Hsp16.3刺激后出现了较短的伪足,沉默 TLR2/4的 M0型巨噬细胞在 MTB Hsp16.3刺激后出现了较长伪足;M0巨噬细胞在MTB Hsp16.3刺激后高表达TLR2/4。 MTB Hsp16.3刺激沉默TLR2/4的M0型巨噬细胞,高表达M1型巨噬细胞相关的细胞因子IL-6、TNF-α、iNOS,低表达M2型巨噬细胞相关的细胞因子IL-10、TGF-β、Ym-1、Fizz1。结论:MTB Hsp16.3通过TLR2/4促进M0型巨噬细胞向M2型转化,抑制M1型巨噬细胞,这可能参与了MTB躲避巨噬细胞的吞噬过程。

  • 4T1荷瘤小鼠肿瘤相关巨噬细胞(TAM)的表型及吞噬功能的研究

    作者:郭强;李康;徐林;蒋正刚;徐薇;储以微;熊思东

    目的:研究小鼠乳腺癌实验动物模型中,荷瘤晚期肿瘤相关巨噬细胞的表型和功能,并探讨其与M2型巨噬细胞的关系.方法:从4T1荷瘤4周的雌性BALB/c小鼠中获取肿瘤相关巨噬细胞,用RT-PCR方法检测其巨噬细胞相关分子CCL3、CCL22、iNOS和Arg Ⅰ的表达水平,用FACS检测巨噬细胞中CDl6/32+和CD206+细胞所占比例,并通过酵母菌吞噬试验评估其功能.结果:肿瘤相关巨噬细胞与荷瘤小鼠的脾脏巨噬细胞相比,表达较高水平的CCL22和CD206,并且对酵母菌的吞噬能力显著下降.结论:4T1荷瘤4周小鼠肿瘤相关巨噬细胞在表型和功能上倾向于替代性活化的巨噬细胞.

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