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IL-12家族亚基基因在大鼠C6胶质瘤细胞表达研究
目的：对大鼠C6胶质瘤细胞应用实时荧光定量PCR（ real-time quantitative PCR，qPCR）法观察白细胞介素-12（Interleukin-12，IL-12）家族亚基基因的表达，为今后IL-12家族在脑胶质瘤方面研究奠定基础。方法：提取大鼠C6胶质瘤细胞RNA，反转录成cDNA，应用qPCR法观察IL-12家族亚基基因在大鼠C6胶质瘤细胞mRNA表达影响并进行比较分析。结果：在大鼠C6胶质瘤细胞中，IL-23a，IL-12a的表达丰度为高，EBI3，IL-27的表达丰度为中，IL-12b的表达丰度为低。结论：IL-12家族与胶质瘤发生、发展密切相关，其中IL-12、IL-23是有潜力治疗脑胶质瘤的细胞因子，其研究进展将为脑胶质瘤的免疫治疗带来新思路。
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胶质细胞源性神经营养因子对胶质瘤促增殖作用的基因表达谱研究
目的 研究胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)促进胶质瘤增殖的差异表达基因.方法 体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞分为3组,正常对照组(对照组)和实验组(GDNF 70μg·L-1干预6 h组和GDNF 70μg·L-1干预12 h组).利用全基因组表达谱芯片技术进行分析,实时定量PCR验证芯片结果,并对差异基因进行聚类分析和信号转导通路分析等.结果 与对照组比较,GDNF干预6 h组和GDNF干预12 h组分别上调772和664个基因,下调282和259个基因.其中,显著的上调基因为NTN1、SLC7A5、NDST1、CD24、NFIC、KDM4A、CEACAM1、SOCS2.下调基因主要有Sctr、C4-2、GNAL、HSD3B1、Stfa2l1等.基于KEGG数据库进行生物学通路分析显示上调基因主要参与葡糖胺聚糖半乳糖基转移酶-硫酸盐肝素的生物合成、细胞的黏附连接、癌症的转录失活、JAK-STAT信号通路等.选取8个差异基因(CD24,CEACAM1、Synpo、Ndst1、Nfic、Ntn1、Socs2、Ccdc6)进行RT-PCR验证,GDNF干预12 h组与对照组比较,CEACAM1、Nfic、Socs2、Ccdc6基因表达倍数显著增加(P<0.05).提示差异基因的mRNA变化趋势与表达谱结果一致.结论 应用全基因组表达谱芯片并结合生物信息学软件分析差异表达基因,为GDNF促进胶质瘤细胞增殖的分子生物学机制的研究提供了依据.
关键词： 胶质细胞源性神经营养因子 大鼠C6胶质瘤细胞 全基因表达谱 细胞增殖 差异基因 -
GDNF促进体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞增殖的时效及量效关系的研究
目的 观察外源性胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)促进大鼠 C6 胶质瘤细胞增殖的时效及量效关系,为深入研究 GDNF 对 C6 细胞的促增殖机制提供佳的时效及量效作用点.方法 将体外培养的 C6 细胞分为空白对照组、溶剂对照组和实验组(GDNF 浓度分别为10、30、50、70、90 μg/L,作用时间分别为 12、24、48、72 h),用 MTT 比色法检测不同浓度 GDNF 通过不同作用时间对 C6 细胞增殖情况的影响.结果 浓度在 50 μg/L 以上的 GDNF 作用 24 h 后,C6 细胞增殖水平升高,在 48 h 时达到高峰而后趋于平稳或呈下降趋势,与对照组比差异有统计学意义.其中,70 μg/L GDNF 作用 48 h 后,C6 细胞的增殖率明显高于其他实验组.结论 外源性 GDNF 促进体外培养的大鼠 C6 胶质瘤细胞增殖的佳时效及量效作用点为浓度 70 μg/L、时间 48 h.
关键词： 大鼠C6胶质瘤细胞 胶质细胞系源性神经营养因子 细胞增殖 时效关系 量效关系
