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抗人DR5单抗与阿霉素联合对人肝癌细胞SMMC-7721协同杀伤效应
目的:探讨mDRA-6对肝癌细胞系SMMC-7721致凋亡作用,及阿霉素与mDRA-6联合协同杀伤效应与机制.方法:常规培养肝癌细胞SMMC-7721,流式细胞术检测细胞表面DR5的表达率.Hoechst 33258染色观察SMMC-7721细胞形态变化;MTT法检测细胞毒性作用;流式细胞术定量分析凋亡细胞率.结果:(1)mDRA-6能够诱导SMMC-7721细胞凋亡,在1.89 μg/ml浓度下可杀伤36%的细胞,增加mDRA-6浓度,凋亡作用无明显增加;(2)SMMC-7721细胞对阿霉素敏感,存在浓度依赖性;(3)阿霉素与mDRA-6联合对SMMC-7721细胞具有协同杀伤作用,2 μg/ml的mDRA-6与40 ng/ml的阿霉素联合杀伤60%SMMC-7721, Hoechst 33258染色和Annexin V/PI染色证实杀伤作用是通过细胞凋亡实现的.结论:mDRA-6能够诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡,阿霉素与mDRA-6联合具有协同作用.
关键词： 抗人DR5单克隆抗体(mDRA-6) 阿霉素 协同杀伤作用 细胞凋亡 -
黄芪多糖协同顺铂对BEL-7404人肝癌细胞的杀伤作用
目的探讨黄芪多糖对人肝癌细胞BEL-7404细胞株细胞周期的影响及与顺铂联合使用,对BEL-7404肝癌细胞的杀伤作用.方法通过四氮甲唑蓝(MTT)实验检测细胞的增殖抑制率,以观察黄芪多糖对肝癌细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞仪检测细胞周期的改变及凋亡率.结果黄芪多糖可抑制肝癌BEL-7404细胞的生长、增殖;与顺铂联合应用对BEL-7404肝癌细胞杀伤作用强于2种药物单独使用.黄芪多糖处理后的BEL-7404细胞出现低于G1期DNA含量的亚二倍体凋亡峰,将细胞周期阻滞于G1期.结论黄芪多糖对肝癌BEL-7404细胞有杀伤作用;黄芪多糖与顺铂联合使用具有协同抗肿瘤作用.
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TRAIL与低剂量5-Fu联用高效诱导大肠癌细胞凋亡的研究
目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)与5-Fu联用是否存在协同性杀伤大肠癌细胞的作用,以及这种杀伤作用的可能机制.方法常规培养大肠腺癌细胞株HT29.TRAIL、5-Fu、或2药联用24 h,采用MTT法测试细胞毒作用,应用流式细胞术检测细胞凋亡比例,透射电镜下观察亚细胞形态.结果①HT29细胞对TRAIL不敏感,100 ng/mlTRAIL只能杀伤4.50%±0.26%的细胞,ID 50＞1 000 ng/ml.细胞对5-Fu相对敏感,存在剂量依赖性细胞毒效应,这种效应主要通过诱导细胞凋亡实现.②TRAIL与阿霉素联用呈现高效协同作用,表现为亚毒性浓度TRAIL(100 ng/ml)与亚毒性浓度5-Fu(100μg/ml)联用可杀死60.00%±0.45%的HT29细胞.③流式细胞术分析及透射电镜观察证实协同性杀伤作用主要通过诱导细胞凋亡实现.结论大肠腺癌细胞株HT29对TRAIL不敏感,但TRAIL与亚毒性浓度5-Fu联用表现出高效的杀灭肿瘤细胞作用,这种细胞毒性作用主要由凋亡介导.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 氟脲嘧啶 协同杀伤作用 细胞凋亡 -
mDRA-6与尼美舒利对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞的协同杀伤效应
背景与目的:mDRA-6为本实验室制备的具有肿瘤细胞杀伤作用的抗人死亡受体5(death receptor 5,DR5)的单克隆抗体,尼美舒利作为特异性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂,近年来发现其对某些肿瘤细胞系的细胞具有促凋亡作用.本研究探讨mDRA-6与尼美舒利对肝癌细胞系SMMC-7721的杀伤作用,及二者有无协同效应.方法:流式细胞术检测细胞表面DR5的表达率;分别用一定浓度的mDRA-6、尼美舒利、mDRA-6联合200 μmol/L尼美舒利处理SMMC-7721细胞,MTT法检测细胞毒性作用,Hoechst33258染色观察SMMC-7721细胞核形态变化,流式细胞术定量分析凋亡细胞率.结果:SMMC-7721细胞表面DR5的表达率为95.0%,mDBA-6能够诱导SMMC-7721细胞凋亡,存在浓度依赖性(r＝0.984,P=0.002),25 ng/mL作用12 h可杀伤10.5%的细胞,1 600 ng/mL作用12 h可杀伤35.0%的细胞.尼美舒利能够诱导SMMC-7721细胞凋亡,200μmol/L作用12 h可使5.0%的细胞凋亡,800 μmoL/L作用12 h可杀伤34.0%的细胞,存在浓度依赖性(r=929,P=0.002).尼美舒利与mDRA-6联合对SMMC-7721细胞具有协同杀伤作用(q=1.23),200μmol/L的尼美舒利协同25 ng/mL与1 600 ng/mL的mDRA-6作用12 h可分别杀伤31.2%与91.1%的SMMC-7721细胞,Hoechst33258染色和Annexin V/PI染色证实杀伤作用是通过诱导细胞凋亡实现的.结论:mDRA-6与尼美舒利均有杀伤SMMC-7721细胞的作用,二者具有协同作用,该作用是通过诱导凋亡实现的.
关键词： 抗人DR5单克隆抗体 尼美舒利 协同杀伤作用 凋亡 SMMC-7721细胞 -
TRAIL与阿霉素联用协同杀伤人结肠癌细胞SW480
背景与目的:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factorrelated apoptosis inducing ligand,TRAIL)可选择性杀伤肿瘤细胞,而不影响正常细胞生长.当一部分肿瘤细胞对TRAIL不敏感时,特定的其它药物可增强其杀伤作用.本文旨在探讨结肠癌细胞SW480对TRAIL的敏感性,以及TRAIL与阿霉素联用对细胞的杀伤作用及可能作用机制.方法:常规培养结肠癌细胞SW480.利用MTT法检测细胞毒性作用,流式细胞术定量分析凋亡细胞比例,透射电镜在亚细胞结构形态上证实凋亡细胞,Western blot分析p53及bcl-2蛋白表达变化.结果:(1)SW480细胞对TRAIL不敏感,100 ng/ml TRAIL只能杀伤7.8%的细胞,IC50＞1 000 ng/ml,且不存在浓度依赖性.(2)SW480细胞对阿霉素敏感,存在浓度依赖性作用,IC50＝65 μmol/L,0.86 μmol/L的阿霉素对细胞不表现杀伤作用.(3)TRAIL与阿霉素合用表现出协同作用,亚毒性浓度TRAIL(100ng/ml)与亚毒性浓度阿霉素(0.86μmol/L)联用可杀伤80%SW480细胞.流式细胞学证实这种杀伤作用主要通过诱导细胞凋亡实现,透射电镜亦观察到大量凋亡细胞存在.药物作用前后,p53及bcl-2蛋白表达水平无明显改变.结论:结肠癌细胞株SW480对TRAIL不敏感,但TRAIL与亚毒性浓度阿霉素联用对癌细胞有协同杀伤作用,这种细胞毒性作用主要表现为细胞凋亡.
