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RNAi结肠癌HOXB7基因表达对癌细胞增殖及凋亡的机制研究
目的:探讨抑制HOXB7基因表达对结肠癌细胞增殖凋亡的影响.方法:通过LipofectamineTM2000脂质体介导法将合成的阴性对照siRNA(阴性对照组)及HOXB7-siRNA(HOXB7转染组)转染人结肠癌SW480细胞,未经特殊处理的细胞为空白组.收集转染48 h的细胞,RT-PCR及Western blot分别检测细胞中HOXB7的mRNA及蛋白表达;分别于转染后的24、48、72、96 h,CCK8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测转染后48 h细胞的凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关 X 蛋白(Bax)及 Notch1信号通路 Notch1、Hes1的蛋白表达.结果:HOXB7转染组HOXB7的mRNA及蛋白表达均显著低于空白组(P<0.05);转染24 h后三组细胞的OD值间差异无统计学意义(P>0.05), 48、72、96 h后,与空白组比较,HOXB7转染组OD值均显著降低(P<0.05);与空白组比较,HOXB7转染组细胞凋亡率显著升高,Bcl-2、Notch1、Hes1蛋白显著下调表达,Bax蛋白显著上调表达(P<0.05).结论:RNAi结肠癌HOXB7基因表达可通过抑制Notch1信号通路降低癌细胞的增殖,并诱导细胞凋亡.
关键词： RNAi 结肠癌 HOXB7基因 Notch1信号通路 -
同源盒基因B7在肝癌组织中的表达及其临床意义
目的:检测肝癌组织中同源盒基因B7(HOXB7)的表达情况,探讨HOXB7 的表达在肝癌发生发展中的意义.方法:分别用RT-PCR、Q-PCR 和Western blot 检测24 例肝癌新鲜组织及相应癌旁正常组织中HOXB7 mRNA 和蛋白表达水平的差异,用免疫组化法检测65 例肝癌石蜡组织切片中HOXB7 的表达,分析其与肝癌临床病理因素的关系.结果:HOXB7 mRNA 和蛋白在肝癌组织中的表达水平高于癌旁正常组织.65 例肝癌石蜡组织中,HOXB7 强阳性率为52.3%(34/65).HOXB7 的强阳性与肝癌的TNM 分期和病理分级密切相关,而与性别、年龄、肿瘤直径、HBsAg、肝硬化无明显相关性.结论:HOXB7 在肝细胞肝癌中表达升高,HOXB7 可成为评价肝癌发生、发展的生物学指标.
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HOXB7基因对裸鼠结肠癌肺转移模型的致癌机制研究
目的 探讨HOXB7基因对裸鼠结肠癌肺转移模型的致癌机制.方法 将转染pcDNA6-scramble或pcDNA6-HOXB7基因重组质粒的HT29人结肠癌细胞株,经裸鼠尾静脉注入后建立稳定的结肠癌肺转移模型.模型裸鼠共20只,其中10只HOXB7组(研究组)和10只Scramble组(对照组).制模8周,观察两组裸鼠肺转移癌情况及生存情况.结果 两组制模成瘤率为100％(20/20).研究组肿瘤体质量和肿瘤大小检测值分别为0.093 g和0.960 mm,明显大于对照组的0.069 g和0.720 mm,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,研究组肿瘤多呈非边缘型、非类圆形、浸润型生长,差异均有统计学意义(P<0.05);两组生存曲线分析,发现研究组生存率为50％,明显劣于对照组的90％,差异有统计学意义(P<0.05).结论 HOXB7基因可促使裸鼠结肠癌肺转移模型的转移形成,且可作为结肠癌肺转移的优良评价指标;HOXB7基因的加入可反馈结肠癌肺转移的模拟演变过程,且可被称为理想的实验小动物模型.
