首页 > 文献资料
-
硝普钠对体外培养的海马神经元NF-κB和caspase-3基因表达的影响
目的 探讨NO供体硝普钠(SNP)诱导体外培养的海马神经元凋亡与核因子-kappaB(NF)-κB p65和caspase-3表达变化的关系.方法 终浓度分别为0、25、50、100、200、400 μmol/L的SNP处理海马神经元24 h,用MTT比色法分析细胞存活率;Hcechst3258荧光染色观察凋亡的形态学改变;DNA琼脂糖凝胶分析凋亡的生化特征;用RT-PCR检测NF-κB p65、caspase-3mRNA表达变化;Westem印迹检测NF-κB p65、caspase-3蛋白表达的变化.结果 SNP可剂量依赖性的降低神经元的存活率;荧光显微镜可见染为高亮蓝色的典型凋亡小体,其细胞核明显固缩、凝聚和断裂;电泳图谱显示清晰的DNA梯度.随着SNP剂量的增加,NF-KB p65 mRNA、NF-κB p65蛋白表达逐渐增加;caspase-3 mRNA表达无改变,但caspase-3酶原被裂解活化;从50μmol/L SNP起,caspase-3相对酶活性显著增加,为对照组的3.02倍,100μmol/L达大值.结论 SNP可诱导培养的海马神经元凋亡,其凋亡机制可能与增加NF-κB p65表达及激活caspase-3酶原有关.
-
硝普钠对CPR后大鼠重要脏器微循环血流量的影响
目的 观察硝普钠对心肺复苏(CPR)后大鼠重要脏器微循环血流量的影响,为提高CPR后微循环灌注寻找新的方法.方法 将SD大鼠随机分成假手术组(n=8)、对照组(n=8)和实验组(n=8).假手术组开胸并于实验开始的0 min、15 min和40 min分别向左心室内3次注射彩色微球.对照组和实验组采用电刺激心外膜法建立心脏骤停(CA)模型,并经CPR达到自主循环恢复(ROSC),对照组于自主循环恢复后15 min开始持续静脉泵入生理盐水4 mL/h和5％葡萄糖溶液2 mL/h;实验组于自主循环恢复后15 min持续静脉泵入生理盐水4 mL/h和溶解有硝普钠的5％葡萄糖溶液2 mL/h(硝普钠浓度为0.01 mg/mL).实验组和对照组分别于致颤前、ROSC后15 min和40 min分别开胸行左心室内注射彩色微球.第3次微球注射后5 min处死大鼠,取心、脑、肾、胃、肠、肺等重要脏器,消化组织并回收微球,通过微球计数间接反映重要脏器微循环血流量的变化情况.结果 ①假手术组3个时间点单位质量微球数比较差异无统计学意义(P＞0.05).②对照组和实验组复苏后15 min与致颤前比较,心、脑、肾、胃、肠等脏器单位质量微球数及肺脏单位质量微球数减少(P＜0.05).③对照组复苏后40 min与复苏后15 min比较,心、脑、肾、胃、肠、肺等脏器单位质量微球数的比较差异无统计学意义(P＞0.05);实验组复苏后40 min与复苏后15 min比较心、脑、肾、胃、肠等脏器单位质量微球数增加(P＜0.05),肺脏单位质量微球数增加(P＜0.05).结论 ①CA大鼠经复苏达到ROSC后,心、脑、肾、胃、肠的微循环血流量均减少.②硝普钠可以改善大鼠CPR后40 min重要脏器微循环血流量.
-
硝普纳对重症急性胰腺炎家兔血浆NO、SOD影响的研究
目的:为了进一步探讨重症急性胰腺炎(ANP)的发病机制及硝普纳的治疗作用.方法:采用胰管内注射5%的牛磺胆酸钠的方法建成家兔ANP模型,动态观察血浆NO、SOD的变化、相应胰腺组织学改变及硝普钠对其的影响.结果:ANP模型组血浆NO、SOD明显下降(p<0.05),而治疗组血浆NO、SOD明显高于非治疗组(p<0.05),胰腺组织学改变明显减轻.提示:ANP早期即出现胰腺微循环障碍,胰腺组织缺血、缺氧、氧自由基的生成增加参与了ANP的病理过程,硝普钠的早期应用可以改善胰腺血循环障碍,减少氧自由基的生成,从而减轻病损改善预后.硝普钠对重症急性胰腺炎有潜在的治疗价值.本实验为临床ANP的早期治疗提供了一新思路.
-
硝普钠治疗重症急性胰腺炎家兔血浆SOD的变化
目的:探讨硝普钠对重症急性胰腺炎治疗作用.方法:采用胰管内注射牛磺胆酸钠溶液的方法建立家兔重症急性胰腺炎(ANP)模型,并用硝普钠进行治疗,动态观察家兔血浆SOD的变化(模型制备后12h、24h、48h).结果:ANP组血浆SOD明显下降(P<0.05),而治疗组血浆SOD明显高于非治疗组(P<0.05).结论:急性重症胰腺炎早期即出现胰腺微循环障碍,胰腺组织缺血缺氧.SOD明显下降及氧自由基的生成增加参与了ANP的病理过程.硝普钠的早期应用可以改善胰腺微循环障碍,减少氧自由基的生成继而减轻病损、改善预后,为临床重症急性胰腺炎的治疗提供了新途径.
-
硝普钠诱导体外培养的海马神经元凋亡的研究
目的:观察一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)对体外培养的海马神经元凋亡的影响.方法:用终浓度分别为0、25、50、100、200、400、600 μmol/L的SNP处理海马神经元24 h,用MTT比色法分析细胞存活率,倒置显微镜、Hoechst 33258荧光染色观察凋亡的形态学改变,DNA琼脂糖凝胶分析凋亡的生化特征.结果:SNP可剂量依赖性的降低神经元的存活率,当SNP浓度为50 μmol/L时,其存活率为56.2%;倒置显微镜观察可见神经元胞体固缩,突起断裂,网络消失;荧光显微镜可见染为高亮蓝色的典型凋亡小体,其细胞核明显固缩、凝聚和断裂,且随SNP剂量的增加,出现凋亡小体的细胞明显增多;50、100、200 μmol/L SNP处理海马神经元,电泳图谱显示清晰的DNA梯度.结论:SNP可诱导培养的海马神经元凋亡.
