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GDNF在帕金森病小鼠的表达及丙戊酸盐对其影响的研究
目的 观察帕金森病小鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)含量的变化及丙戊酸盐(valproate,VPA)对GDNF表达的影响.方法 采用C57BL小鼠MPTP法建立帕金森病模型,通过原位杂交方法观察GDNF表达,对检测部位恒定视野内GDNF阳性细胞进行灰度扫描.结果 与盐水对照组相比,模型组、模型给药组和单独给药组小鼠纹状体、海马、皮质GDNF表达均增强(P<0.05).结论 帕金森病小鼠神经元内GDNF含量增多,可能有利于受损神经元的修复;丙戊酸盐可能通过促进GDNF的表达而保护神经元.
关键词： 帕金森病 胶质源性神经生长因子 丙戊酸盐 -
针刺对实验性脑出血大鼠脑组织GDNF和nestin表达的影响
目的:探讨急性脑出血后胶质源性神经生长因子(GDNF)和巢蛋白(nestin)的动态表达及针刺的干预作用.方法:选取健康的雄性Wistar大鼠160只,随机分为模型组、模型加针刺组(针刺组)、模型加忆立福组(西药组)3组.每组又分为6h、24h、48h、72h和168h5个时相点,每个时相点有10只大鼠,空白对照组10只,其余制备脑出血大鼠模型,运用免疫组化等方法检测各组大鼠脑组织中GDNF和nestin阳性细胞的表达以及针刺治疗对它们的影响.结果:模型组6h出现GDNF阳性细胞表达增加,1天时达高峰,7天时仍有表达,针刺组与模型组、西药组相比有统计学意义(P＜0.01);模型组6h出现nestin阳性表达增加,2天时达高峰,7天时仍有表达,针刺组与模型组、西药组相比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:针刺通过调控神经营养因子GDNF和神经干细胞nestin的表达,增加神经干细胞增殖分化能力,这可能是针刺“百会”透“曲鬓”改善脑出血大鼠神经功能缺损症状和大鼠脑组织超微结构,治疗急性脑出血神经重塑的机制之一.
关键词： 针刺 脑出血 胶质源性神经生长因子 巢蛋白 -
牙齿损伤后降钙素基因相关肽和胶质源性神经生长因子在三叉神经节中的表达变化
目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)和胶质源性神经生长因子(GDNF)在大鼠磨牙损伤后不同时段三叉神经节中表达变化.方法:制备大鼠磨牙机械损伤的模型,对其三叉神经节中CGRP和GDNF进行免疫组化染色.结果:在正常三叉神经节中CGRP呈阳性反应,GDNF染色呈阴性;损伤后即刻组CGRP染色阳性,GDNF少许表达;3天组GDNF染色强阳性;损伤5天后CGRP染色强阳性,GDNF表达开始减弱;损伤9天后两者表达恢复到正常水平.结论:CGRP和GDNF参与并促进牙齿损伤后的痛过敏及神经再生修复.
关键词： 降钙素基因相关肽 胶质源性神经生长因子 牙齿损伤 免疫组织化学 -
载胶质源性神经生长因子明胶微球的制备
目的：研究载胶质源性神经生长因子（GDNF）明胶微球的制备。方法采用乳化法制备B型明胶微球，并使用1‐乙基‐（3‐二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐（EDC ）对明胶微球进行交联。通过离子聚合的方式使带相反电荷的B型明胶微球与GDNF结合。对制备的载GDNF明胶微球的形态、粒径分布、溶胀率、交联比率以及体外释放特点进行观察研究。结果制备的明胶微球表面光滑，分散性好，并且成球性良好，平均粒径为（3.91±1.87）μm。可以通过交联剂的浓度和交联的时间控制明胶微球的交联率。在模拟体内环境下，前3 d突释现象较明显，3 d后GDN F开始呈线性缓慢释放，4‐16 d每天平均释放83 pg。结论 EDC交联的B型明胶微球可以通过离子结合的方式结合GDNF ，并能利用载GDNF明胶微球实现GDNF的控释。
关键词： 明胶微球 胶质源性神经生长因子 -
褪黑素对脑出血大鼠血肿周围GDNF、NGB表达的影响
目的 探讨褪黑素促进脑出血后内源性神经保护和修复的作用及其相关机制. 方法 130只健康SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组(10只)、假手术组(40只)、脑出血模型组(40只)、褪黑素组(40只),后2组采用Rosenberg法建立脑出血模型,褪黑素组术后每天1次腹腔注射1 mg/mL褪黑素(10 mL/kg).分别于脑出血后12h、ld、2d、4d、7d时应用修正神经功能缺损评分(mNSS)对各组大鼠进行神经行为学评分,免疫组织化学染色检测血肿周围脑组织中内源性胶质源性神经生长因子(GDNF)、脑红蛋白(NGB)阳性细胞表达,荧光实时定量PCR技术分析GDNFmRNA、NGBmRNA转录水平的动态变化,Western blotting检测GDNF蛋白表达. 结果 脑出血后1d、2d、4d、7d时,褪黑素组mNSS评分均明显低于脑出血模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).脑出血后12h时脑出血模型组、褪黑素组GDNF阳性细胞表达明显升高,7d时仍高于正常对照组,且脑出血后各时间点褪黑素组GDNF、NGB阳性细胞表达均明显高于脑出血模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).脑出血模型组GDNF mRNA转录水平在脑出血后1d时达到峰值,7d时仍高于正常对照组;褪黑素组GDNF mRNA转录水平在脑出血后12h时升高到峰值;脑出血模型组NGB mRNA转录水平在脑出血后1d时达到峰值,4d、7d时水平再次升高;褪黑素组NGBmRNA转录水平在脑出血后12h时升高到峰值,7d时再次升高.脑出血后12h、4d、7d时,褪黑素组GDNF蛋白表达明显高于脑出血模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 褪黑素可能是通过诱导GDNF、NGB早期表达从而具有促进内源性神经保护和修复的作用.
关键词： 褪黑素 脑出血 内源性神经保护 胶质源性神经生长因子 脑红蛋白 -
帕金森病基因治疗目的基因的表达及选择
帕金森病(PD)是一种多发于中老年人,以运动困难、肌肉强直、静止性震颤为特征的缓慢进展的神经变性疾病,特别是散发性,常有多种遗传和环境因素共同影响下引起的一种复杂性疾病.寻找疾病的易感基因,应用于基因治疗研究,是治疗PD的关键问题之一.特别是目的基因选择的要求越来越高,现将目前目的基因的选择及表达综述如下.
关键词： 帕金森病 基因治疗 目的基因 酪氨酸羟化酶 胶质源性神经生长因子 -
人胶质源性神经生长因子真核表达载体构建及在大鼠脊髓组织中的表达
目的 探索人胶质源性神经生长因子(human glial derived neurotrophic factor,hGDNF)真核表达载体,体内直接转染SD大鼠脊髓组织治疗急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的可能性.方法 基因重组和限制性内切酶酶切构建真核表达载体pcDNA3-hGDNF,经脂质体DOTAP介导质粒转染SD大鼠脊髓组织,作为实验组;对照组大鼠直接注射空载体脂质体混合物.14 d后取材,RT-PCR及Western blot检测hGDNF mRNA及蛋白表达.结果 重组真核表达载体pcDNA3-hGDNF经限制性内切酶Hind Ⅲ和Xba-Ⅰ酶切后,电泳显示400 bp hGDNF目的片段和5 400 bp pcDNA3载体片段.转染大鼠脊髓组织后14 d,RT-PCR检测出目的基因mRNA,Western blot检测出hGDNF的蛋白表达.结论 构建的真核表达载体pcDNA3-hGDNF能在转染的大鼠脊髓组织中表达,可为基因治疗修复急性SCI奠定基础.
关键词： 脊髓损伤 胶质源性神经生长因子 基因转染 脂质体 大鼠
