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Ras信号通路在HIV-1 Tat诱导ZO-1及脑啡肽酶破坏的作用
目的 探讨Ras信号传导通路在人类免疫缺陷病毒-1型反式转录激活因子(HIV-1 transactivator of transcription,HIV-1 Tat)诱导血脑屏障(BBB)中紧密连接蛋白Zonula Occludens(ZO)-1及脑啡肽酶(Neprilysin,NEP)破坏的作用.方法 以不同浓度Ras信号传导通路抑制剂法尼基硫代水杨酸(farnesylthiosalicylic acid,FTS)刺激培养好的人脑微血管内皮细胞(human cerebral microvascular endothelium cells,HBEC5-i),并设立对照组,观察其对细胞活力的影响.分别予以HIV-1 Tat、FTS刺激细胞,以蛋白免疫印迹法及实时反转录聚合酶链式反应(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测HIV-1 Tat诱导的紧密连接蛋白ZO-1及NEP(脑内降解β淀粉样蛋白Amyloid-beta,Aβ的限速酶)的蛋白和mRNA表达的变化.结果 FTS在20μmol/L(0.35±0.06)以下时对HBEC-5i活力无明显影响(P>0.05),HIV-1 Tat能抑制HBEC-5i的ZO-1、NEP蛋白(0.53±0.07,P<0.01;0.40±0.04,P<0.05)与mRNA(0.42±0.10,P<0.05;0.31±0.09,P<0.05)的表达.用FTS阻断Ras信号通路后可显著增加ZO-1、NEP蛋白(1.20±0.22,P<0.01;0.58±0.03,P<0.05)及mRNA(1.10±0.19,P<0.05;0.97±0.38,P<0.05)的表达.结论 HIV-1 Tat可促进紧密连接蛋白ZO-1蛋白和mRNA下调而导致血脑屏障破坏,同时诱导脑内脑啡肽酶NEP蛋白和mRNA下调,可能导致Aβ在脑内沉积增加.阻断Ras信号传导通路可抑制HIV-1 Tat诱导的ZO-1和NEP破坏,可能减少Aβ在脑内的沉积.
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Ras信号通路与抑郁症神经可塑性机制
抑郁症的确切病因及病理机制尚不清楚.近几年,越来越多的证据提示神经可塑性机制在抑郁症发病及治疗中的作用,其中神经营养因子在神经可塑性中发挥着极其重要的作用.Ras相关信号通路作为一条重要的神经营养因子受体下游信号通路在神经可塑性中发挥着重要的作用.该文对Ras信号通路与抑郁症神经可塑性机制的相关研究进行综述.
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干扰素诱导蛋白204抑制大鼠血管外膜成纤维细胞增殖
目的:探讨干扰素诱导蛋白204(p204)对大鼠血管外膜成纤维细胞(VAFs)增殖的影响及可能机制.方法:将大鼠VAFs分为空白对照组(N组)、非特异性小干扰RNA(siRNA)转染组(control组)、IFN-α干预组(IFN-α组)及Ifi204 siRNA转染组(Ifi204 siRNA组),给予相应处理;应用Real Time qRT-PCR法检测p204mRNA表达,MTT比色法测定细胞活力,流式细胞仪分析细胞周期,Western blot检测p204、Ras蛋白表达及Raf与Erk磷酸化水平.结果:与N组比较,IFN-α组p204 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05),细胞活力下降,细胞周期G1/S转换下调(P＜0.05),伴Ras蛋白表达减少,Raf及Erk磷酸化水平下降(P＜0.05);Ifi204 siRNA组p204 mRNA及蛋白表达下调(P＜0.05),细胞活力增高,G0/G1期细胞减少,S期细胞增多(P＜0.05),Ras蛋白表达增多,Raf及Erk磷酸化水平升高(P＜0.05);而control组上述指标与N组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:p204表达可抑制大鼠VAFs增殖,Ras信号通路可能参与p204对VAFs增殖的调控.
关键词： 干扰素诱导蛋白204 成纤维细胞 增殖 Ras信号通路 大鼠 Sprague-Dawley
