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申克孢子丝菌和暗色真菌的分离
目的:研究申克孢子丝菌和暗色真菌的分布情况及其生态学.方法:从吉林地区自然环境中采集腐木、土壤、陈玉米秸、陈麦秸等标本70份,用含放线菌酮的改良沙氏培养基分离菌株,沙氏培养基传代培养,通过观察菌落的外观形态、显微镜下菌丝和孢子的生长形态等方法,鉴定申克孢子丝菌和暗色真菌.结果:70份标本中鉴定出申克孢子丝菌和暗色真菌共37株,分离阳性率为52.86%,其中申克孢子丝菌6株(8.57%),外瓶霉属14株(20%),链格孢3株(4.29%),着色真菌5株(7.14%),疣状瓶霉4株(5.71%),待定5株(7.14%).同时还分离出镰刀菌、念珠菌、曲霉、青霉菌等条件致病菌.结论:研究申克孢子丝菌和暗色真菌、孢子丝菌病、皮肤着色真菌病及暗色丝孢霉病的发病原因及预防具有重要意义.
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菌落PCR技术快速鉴别丝状真菌的实验研究
目的 探讨菌落PCR在检测病原性丝状真菌方面的应用价值.方法 初步建立用于丝状真菌的菌落PCR检测技术,用19种丝状真菌标准株进行验证,所有菌落PCR扩增产物进行测序,并选取8种菌株的菌落PCR产物和酶切结果与常规PCR进行比较,检测其准确性和可靠性.结果 19株菌中有16株(84.2%)菌落PCR成功扩增内转录间隔(ITS)区,ITS区基因序列分析鉴定菌种正确,与NCBI数据库中相同菌种的相似度为96%～100%;与常规PCR进行比较的8株菌中,除构巢曲霉菌落PCR扩增结果为阴性外,其他菌种菌落PCR产物及酶切条带与常规PCR基本一致.结论 与常规PCR相比,菌落PCR检测丝状真菌操作简单,省时省力,鉴定菌种具有较高的准确性和可靠性,可以用于丝状真菌的快速鉴定.
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南昌地区7251例门诊皮肤黏膜真菌病及病原菌分析
目的 了解南昌地区皮肤科门诊真菌感染性疾病的构成情况.方法 统计我院门诊2006-2008年期间诊断的所有皮肤和黏膜真菌病,分析病种和致病菌种与年龄、性别和发病季节的关系.结果 皮肤和黏膜真菌病共7251例,男女比为2.3∶1.股癣2702例占37.3%、花斑糠疹1505例占20.8%,手癣727例占10.0%,分别居第1～3位.除花斑糠疹未进行培养外,培养阳性菌株4953株,优势菌为红色毛癣菌(69.9%)、念珠菌(20.4%)和紫色毛癣菌(4.5%).不同年龄段、性别及季节的病种和病原菌分布差异具有统计学意义.结论 南昌地区皮肤门诊中皮肤和黏膜真菌病以股癣病例数多,致病菌主要为红色毛癣菌,头癣致病菌主要为紫色毛癣菌,与其他地区报道不尽相同.
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土壤中暗色真菌分离方法的研究
目的 寻找经济有效的土壤中暗色真菌的分离方法.方法 将一份含有暗色真菌的土壤样品悬液10倍比稀释成4个浓度,并配成含抗生素和不含抗生素2组,8支样品液分别接种于沙氏葡萄糖蛋白胨培养基(SDA)、马铃薯匍萄糖琼脂培养基(PDA)、孟加拉红培养基,各培养基含有0,100,200,300,500 mg/L 5个浓度的放线菌酮和100万U/L青霉素,50 mg/L氯霉素,200 mg/L链霉素,分别采用涂布法与倾注法培养,每种培养基共接种80个平皿.结果 三种培养基的分离效率分别为:PDA 70%,孟加拉红67.5%,SDA 3.75%.土壤液稀释100倍和培养基中放线菌酮质量浓度为200 mg/L时的分离效率高,土壤液原液和稀释100倍时分离效率在PDA分别为50%和85%,两组比较,P＜0.05;在孟加拉红培养基分别为45%和85%,两组比较,P＜0.05.各培养基中无放线菌酮和放线菌酮质量浓度为200 mg/L时分离率分别为PDA 31.25%和87.5%,两组比较,P＜0.05;孟加拉红培养基分别为37.5%和81.25%,两组比较,P＜0.05.样本液中加抗生素和不加抗生素分离率比较,差异无统计学意义.各培养基涂布法与倾注法比较,总的分离率差异无统计学意义,但样品液中不加放线菌酮等抗生素时,倾注法比涂布法分离效率高,PDA分别为80%和40%,孟加拉红分别为80%和30%.各自比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 改良的马铃薯、孟加拉红培养基是适合土壤中暗色真菌分离的培养基,培养基中放线菌酮浓度为200 mg/L为适浓度,采用倾注平板法时方便、经济、有效.
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江西省农村地区浅部真菌病现场调查及致病菌的研究
目的 了解江西省农村地区居民浅部真菌病构成情况及致病菌的种类.方法 2006年9月至2007年6月对江西省的11个地市、54个县区的66个乡(镇)、村居民以义诊的形式进行浅部真菌病现场调查,同时对513例具有典型临床表现且真菌镜检阳性的皮损进行真菌培养.结果 共调查浅部真菌病患者1284例,其中务农者947例,占73.75%.浅部真菌病包括足癣736例(57.32%)、手癣202例(15.73%)、甲真菌病72例(5.61%)、体癣47例(3.66%)、股癣29例(2.26%)、花斑癣23例(1.79%)、头癣1例、皮肤念珠菌病1例、手足癣135例(10.51%)、手癣合并指甲真菌病12例、足癣合并趾甲真菌病10例、手足癣合并指趾甲真菌病8例、体股癣3例、手癣合并体癣2例,以及手足癣合并体癣、足癣合并花斑癣、足癣合并体癣各1例.分离出致病真菌480株,其中红色毛癣菌301株、白念珠菌88株、须毛癣菌41株、其他菌50株.结论 浅部真菌病的致病菌以红色毛癣菌占优势,白念珠菌第二,各地市之间菌种分布构成差异无统计学意义.
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产孢丝状真菌药敏试验检测暗色真菌对九种药物的敏感性
目的检测暗色真菌对9种常用抗真菌药物的敏感性,评价美国国家实验室标准委员会(NCCLS)推荐的产孢丝状真菌药敏试验方案(M38-P)应用于暗色真菌药敏试验的可行性.方法参照M38-P方案,受试菌株共45株,包括卡氏枝孢14株,裴氏着色霉8株,紧密着色霉3株,疣状瓶霉16株,离蠕孢2株,德氏霉1株及弯孢1株.所用药物为氟康唑、氟胞嘧啶、伊曲康唑、咪康唑、益康唑、克霉唑、制霉菌素、两性霉素B和特比萘芬.菌悬液终浓度为(0.4～5)×106 cfu/mL,孵育温度35℃,培养时间5～7 d.结果45株暗色真菌对伊曲康唑和特比萘芬的敏感性较高,部分菌株对氟康唑、氟胞嘧啶、伊曲康唑、两性霉素B存在耐药现象.结论M38-P方案可用于暗色真菌的药敏试验研究,耐药菌株的发现提示在今后的治疗中药敏测试是必要的.
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从野生蟾蜍分离致病性着色真菌的研究
目的从野生蟾蜍分离致病性着色真菌.方法在着色芽生菌病高发区和无病区分别捕捉野生蟾蜍,取内脏制成悬液分离着色真菌.结果在着色芽生菌病高发区山东章丘,354只野生蟾蜍中有151只分离出着色真菌,占42.7%,共计分离出着色真菌11种,162株,其中疣状瓶霉49株,外瓶霉33株,瓶霉属19株,甄氏外瓶霉19株,卡氏枝孢12株,可疑卡氏枝孢3株,喙枝孢7株,裴氏着色霉5株,毛样枝孢4株,棘状外瓶霉3株,枝孢属3株,小尾枝孢1株,未鉴定4株.而在无病区山东莱阳,45只蟾蜍中仅有4只分离出非致病性着色真菌,占8.9%.结论着色芽生菌病流行区野生蟾蜍真菌的分离阳性率显著高于非流行区,且分离出多种致病性着色真菌,提示野生蟾蜍带菌与着色芽生菌病的流行相关.
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丝状真菌的药物敏感性测定研究进展
美国国家临床实验标准委员会(NCCLS)推荐的体外丝状真菌药物敏感性实验方法,经众多的实践研究,尚存在一些不足.现就近年国外对此方法适应范围的补充、影响因素及替代方法的研究现状进行综述.
