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朊蛋白106-126肽段对分化后PC12细胞的凋亡作用
目的:研究朊蛋白106-126肽段在细胞水平上的毒性作用.方法:PC12细胞常规培养后加入神经生长因子(NGF)诱导成神经元样细胞,再加入朊蛋白106-126肽段,MTT法检测细胞存活率,同时观察细胞生长和形态变化,通过形态学改变、流式细胞术和DNA电泳检测细胞凋亡.结果:细胞接触肽段后存活率下降28.9%;光镜下可见细胞贴壁不良,胞体缩小,细胞突起断裂缩短;荧光染色可见细胞突起缩短、胞核固缩、胞质染成橘红色的凋亡细胞;电镜下可见胞质中出现空泡样结构,细胞染色质浓集于核膜内侧并裂解成碎块状;流式细胞仪检测细胞出现亚二倍体峰,DNA电泳出现梯状带.结论:朊蛋白106-126肽段能够诱导分化后的PC12细胞凋亡,具有明确的毒性作用.利用106-126肽段感染分化的PC12细胞可能是在细胞水平上研究朊蛋白毒性作用的理想模型.
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PrP 106-126肽段对分化PC12细胞能量代谢的影响
目的:研究朊蛋白106-126肽段对分化PC12细胞能量代谢的影响.方法:PC12细胞培养后加入神经生长因子(NGF),再加入朊蛋白106-126肽段,观察细胞存活率、线粒体形态学、线粒体膜电位和Ca2+-ATPase活性的改变.结果:细胞接触肽段后存活率下降28.9%;光镜下可见细胞贴壁不良,胞体缩小,细胞突起断裂缩短;电镜下可见核移位,染色质凝集,部分胞核呈碎块状,线粒体肿胀、嵴紊乱、断裂;膜电位和Ca2+-ATPase的活性随着肽段的作用时间的延长而减小.结论:朊蛋白106-126肽段对分化PC12细胞具有毒性作用,能量代谢障碍可能是其毒性作用机制之一.
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朊蛋白106-126肽段对PC12细胞毒性作用的形态学观察
目的 研究朊蛋白106-126肽段在细胞水平上的毒性作用.方法 PC12细胞常规培养后加入神经生长因子(NGF)诱导成神经元样细胞,再加入朊蛋白106-126肽段,MTT法检测细胞存活率,观察细胞生长和形态变化.结果 细胞接触肽段后存活率下降.光镜下可见细胞贴壁不良,胞体缩小,细胞突起断裂缩短;荧光染色可见到突起缩短、胞核固缩并染成橘红色的凋亡细胞;电镜下可见胞质中出现空泡样结构,细胞染色质浓集于核膜内侧并裂解成碎块状,可见凋亡小体.结论 利用106-126肽段感染分化的PC12细胞可能是在细胞水平上研究朊蛋白毒性作用的理想模型.