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MMP-9和TIMP-1 mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其意义
目的:探讨MMP-9和TIMP-1 mRNA在食管鳞状细胞癌和对应癌旁组织中的表达差异及其相关性.方法:选取新鲜手术切除的食管癌标本98例,每例分别取癌组织和对应的癌旁组织各1份,采用RT-PCR法检测MMP-9和TIMP-1 mRNA在食管鳞状细胞癌组织和对应癌旁组织中的表达,分析食管癌组织中MMP-9和TIMP-1 mRNA表达与临床病理特征的关系;采用Pearson相关分析法分析MMP-9与TIMP-1 mRNA在食管鳞状细胞癌组织中表达率的相关性.结果:食管癌组织中MMP-9 mRNA阳性表达率高于癌旁组织,阳性表达率比较差异有统计学意义(x2=22.873,P=0.000);食管癌组织中TIMP-1 mRNA阳性表达率高于癌旁组织,阳性表达率比较差异有统计学意义(x2 =7.864,P=0.005).MMP-9 mRNA表达率与食管鳞状细胞癌浸润深度有关联(x2=5.022,P=0.025),与食管鳞状细胞癌淋巴结转移无关联(x2=0.617,P=0.432).TIMP-1mRNA的表达与食管鳞状细胞癌浸润深度有关联(x2=4.982,P=0.026),与食管鳞状细胞癌淋巴结转移无关联(x2=0.527,P=0.468).MMP-9 mRNA与TIMP-1 mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达率呈正相关关系(r=2.237,P=0.028).结论:MMP-9和TIMP-1 mRNA表达可能参与了食管鳞状细胞癌的发生发展,但在食管鳞状细胞癌淋巴结转移方面可能不发挥关键作用.
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食管鳞状细胞癌NET1的表达和淋巴管浸润与病理的相关性
目的 探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中神经上皮细胞转化基因1(neuroepithelial cell transforming gene 1,NET1)的表达及D2-40标记的肿瘤淋巴管浸润与病理之间的相关性.方法 采用Western印迹法检测ESCC组织及正常食管组织中NET1蛋白的表达情况,免疫组织化学法检测ESCC中NET1及D2-40的表达情况,观察D2-40标记的淋巴管内癌细胞浸润(lymphatic vessel invasive,LVI)的情况,分析NET1、LVI与临床病理指标之间的关系及患者5年生存率的差异.结果 NET1在ESCC组织中阳性表达率(++/+++)为61.3％ (20.4％/40.9％) (49/80),正常食管组织中表达阳性率为10.5％ (2/19),2例均为弱阳性(+),LVI在ESCC组织中的阳性率为36.3％ (29/80),NET1高表达、LVI阳性与ESCC的淋巴结阳性转移、临床分期呈正相关(P＜0.05),与肿瘤的神经血管侵犯相关(P＜0.05),而与性别、年龄、组织学分级无明显相关性(P＞0.05).NET1高表达与LVI阳性密切相关(P=0.012),NET1高表达或LVI阳性的ESCC患者术后的生存率明显降低,而且同时存在NET1高表达和LVI阳性的ESCC患者术后5年生存率低.结论 联合检测NET1及LVI可以提高对食管鳞癌患者的术后临床病理分期及预后的判断的准确性.
关键词： 神经上皮细胞转化基因1 D2-40 食管鳞状细胞肿瘤 淋巴管浸润 -
食管鳞状细胞癌中Beclin1表达及其对增殖的影响
目的 探讨Beclin1在食管鳞状细胞癌(esophagus squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及意义,分析其过表达对人ESCC细胞株TE1体外生长活性的影响.方法 分别采用免疫组化SP法和RT-PCR技术检测57例ESCC及癌旁正常食管黏膜组织中Beclin1蛋白及mRNA的表达;利用基因转染、RT-PCR及Western blot法观察外源性Beclin1过表达对ESCC细胞株TE1的影响;MTT法分析外源性Beclin1过表达对TE1细胞增殖的影响;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测转染后肿瘤细胞的细胞周期和凋亡;在荧光显微镜下观察转染后肿瘤细胞的自噬.结果 免疫组化染色结果示,在ESCC中Beclin1蛋白的阳性率为29.82%(17/57),明显低于癌旁正常食管黏膜组织100%(57/57)(P＜0.00),Beclin1蛋白的表达与ESCC患者的分化程度(χ2=6.158,P=0.046)、淋巴结转移(χ2=5.664,P=0.017)有关;与患者性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度无关;RT-PCR检测结果示,在ESCC中Beclin1 mRNA的表达量(0.168±0.038)明显低于癌旁正常食管黏膜组织(0.280±0.052)(P＜0.00).pCMV6-Entry-Beclin1脂质体法转染TE1细胞后,在mRNA和蛋白水平Beclin1的表达均高于TE1PE组及TE1组.在TE1细胞中过表达Beclin1后可抑制肿瘤细胞的体外生长,抑制率为57.21%.FCM检测pCMV6-Entry-Beclin1转染后G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少,细胞增殖受到抑制;凋亡率为5.91%,高于TE1PE组和TE1组(P＜0.05).在荧光显微镜下见TE1Beclin1组中MDC标记的自噬囊泡数量明显增加.结论 自噬相关基因Beclin1 mRNA及蛋白在ESCC中表达下调,自噬活性的降低可能与ESCC的发生、发展及侵袭转移有关;Beclin1过表达可抑制人ESCC细胞株TE1的增殖,并诱导其自噬和凋亡,利用自噬基因Beclin1对ESCC基因治疗也许具有可行性.
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食管鳞状细胞癌组织中NF-κB,COX-2的表达及其临床意义
目的 检测食管鳞状细胞癌组织及正常食管组织(距肿瘤部位5cm以上)核因子-κB(NF-κB)和环氧合酶-2(COX-2)的表达水平及与临床病理指标关系,探讨其在食管鳞状细胞癌发生发展中的作用及其相互关系.方法 选取2011年1月～2013年1月在我院胸外科行食管癌根治术的食管鳞状细胞癌患者50例,选取同期在我院胸外科行食管癌根治术的10例正常食管黏膜标本作为对照,采用免疫组化SP法检测癌组织和正常食管组织中NF-κB,COX-2的表达水平,分析其在不同组织中的阳性表达率、与患者临床病理指标关系、相互关系及与食管鳞状细胞癌的关系.结果 ①NF-κB在食管鳞状细胞癌的阳性率明显高于正常食管组织,两者比较,差异有显著性(p＜0.001),COX-2在食管鳞状细胞癌组织的阳性率明显高于正常食管组织,两者比较,差异有显著性(P＜0.001).②NF-κB在食管鳞状细胞癌组织中的表达与患者的年龄、性别、部位、浸润深度、临床分期无关(P＞0.05),而与食管鳞状细胞癌有无淋巴结转移、分化程度有荚(P＜0.05).COX-2在食管鳞状细胞癌组织中的表达与患者的年龄、性别、部位、浸润深度、临床分期、分化程度无关(P＞0.05),而与淋巴结转移有关(P＜0.05).③食管鳞状细胞癌组织中NF-κB与COX-2的表达呈正相关关系,相关系数γ=0.5238 (P ＜0.01).结论 NF-κB,COX-2在食管鳞状细胞癌发生发展中超重要作用,参与了食管鳞状细胞癌的发病,且与食管鳞状细胞癌的侵袭、转移及预后有一定的关系,对评价食管鳞状细胞癌的恶性程度、有无转移和预后有一定的参考价值.在食管鳞状细胞癌中,NF-κB与COX-2表达呈正相关,表明其在食管鳞状细胞癌的发生发展中起协同作用.
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TIMP-1在食管鳞状细胞癌中的表达及意义
目的:探讨金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)在食管鳞状细胞癌及其癌旁正常组织中的表达及与临床病理因素间的关系.方法:100例新鲜离体手术切除食管癌标本,每例分别各取癌组织及对应癌旁组织1份,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法分别检测TIMP-1 mRNA在癌及癌旁正常组织中的表达;采用Western Blot法检测TIMP-1蛋白在癌及癌旁正常组织中的表达.结果:TIMP-1 mRNA在癌及癌旁正常组织中的表达分别为0.736 4±0.082 9和0.516 0±0.056 0,差异有统计学意义(t=2.203,P=0.029);TIMP-1 mRNA在T1+T2期及T3+T4期食管癌组织中的表达分别为0.536 6±0.097 9和0.695 0±0.075 4,差异有统计学意义(t=2.006,P=0.043);TIMP-1 mRNA在高、中、低分化食管癌组织中的表达分别为0.396 6±0.074 3,0.907 2±0.128 1和0.548 5±0.089 8,差异有统计学意义(F=3.520,P=0.033);TIMP-1 mRNA在有无淋巴结转移、不同大体病理类型、不同性别及不同年龄食管癌间比较,差异均无统计学意义.随机选取的5例标本的Western Blot的检测结果与RT-PCR结果一致,肿瘤组织内的表达高于癌旁正常组织中的表达.结论:TIMP-1在食管鳞状细胞癌浸润生长方面可能发挥了促进作用,与食管癌分化程度可能有关,但与食管鳞状细胞癌淋巴结转移可能无关.
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TMSG-1和Cyclin D1在食管鳞癌的表达及临床病理意义
目的：探讨肿瘤转移抑制基因－1（TMSG-1）及细胞周期素 D1（Cyclin D1）在食管鳞癌（ESCC）中的表达及其与患者预后的关系。方法：采用SP免疫组化染色法检测136例ESCC及13例正常食管黏膜组织中TMSG-1及Cyclin D1蛋白的表达情况，分析二者与ESCC患者临床病理指标及预后的相关性。结果：（1） TMSG-1与 Cyclin D1在 ESCC 中的阳性率分别为52．2％、65．4％，在正常食管黏膜中的阳性率则分别为100．00％、23．1％，差异具有显著性。（2）TMSG-1及Cyclin D1的异常表达均与ESCC组织学分级、TNM分期及淋巴结转移相关。（3）TMSG-1及Cyclin D1在ESCC的表达呈负相关。（4）TMSG-1、Cyclin D1均是影响ESCC术后生存的独立因素。结论：TMSG-1与Cyclin D1的异常表达在ESCC的发生、发展中可能起协同作用，可作为较为理想的肿瘤标志物辅助判断患者预后并指导临床治疗。
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食管鳞状细胞癌侵袭和转移相关miRNA研究进展
食管癌(EC)是食管上皮组织常见恶性肿瘤,其发病率在恶性肿瘤中居第八位,死亡率居第六位,全世界每年约有48万新增病例[1].食管鳞状细胞癌(ESCC)是中国食管癌主要病理类型[2-3].由于ESCC早期诊断率低且转移性强,尽管治疗方法有了很大进步,但患者预后仍较差.微小RNA(miRNA)作为潜在的肿瘤生物标记物,具有很好的临床应用前景.近年来研究发现,miRNA与肿瘤发生、发展、侵袭和转移也密切相关.
