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人胎盘中Sa抗原的制备
目的:探讨从人胎盘中提取和分离Sa抗原的方法及进行性质分析。方法:用DE 52离子层析法初步提取人胎盘中可溶性蛋白,再应用SDS-PAGE进行各层析组分分离,确定Sa抗原所在组分;将Sa抗原用酸、碱和蛋白酶K处理后分析其性质。结果:Sa抗原是相对分子量为5 000Ar的蛋白抗原,存在于0.20~0.25mol/LNaCl的TBS洗脱组分中,在-20℃下可稳定保存120d。结论:用人胎盘来制备Sa抗原其性质稳定、来源方便、方法较简单,适用于免疫印迹法检测抗Sa抗体。
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长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶的分离纯化方法研究
目的:研究长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶的简单分离纯化方法.方法:采用DEAE-Sephadex A-25及Sephadex G-25层析的方法,比较二者对长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶简单分离纯化的效果.结果:从长白山白眉蝮蛇蛇毒中分离出类凝血酶,SDS-PAGE电泳显示为一条带,分子量大约为35.5 kDa,达到电泳纯.理化性质研究表明,此类凝血酶具有体外凝血活性,体外凝血酶比活力为12.57IU·mg-1,用N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐测得该酶的精氨酸酯酶比活力为137.65IU·mg-1.用蛋白酶抑制剂和乙二胺四乙酸对该酶进行抑制实验,结果表明该酶属于丝氨酸蛋白酶,而不是金属蛋白酶.结论:本方法可用于长白山白眉蝮蛇蛇毒中类凝血酶的分离纯化.
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血浆分离组分Ⅰ+Ⅲ提取人免疫球蛋白方法初探
目的 为提高人免疫球蛋白收率,纯化血浆分离组分Ⅰ+Ⅲ并回收高纯度的人免疫球蛋白,进行方法学初步研究.方法 用辛酸沉淀结合PALL公司提供的S Hypercel阳离子柱、Hypercel STAR AX阴离子柱两步离子交换层析法进行纯化.结果 通过对数据分析得出,IgG单体二聚体达到99%以上,IgG纯度达到97%以上,收率达到80%以上.结论 该方法能够很好纯化血浆分离组分Ⅰ+Ⅲ,回收高纯度的人免疫球蛋白.