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UGPase基因缺失株文献资料
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羊布鲁菌16MUGPase基因缺失株的构建及其特性分析
目的 构建羊布鲁菌16M株的尿苷三磷酸-葡萄糖-1-磷酸-尿苷酰基转移酶(UTP-glucose-1-phosphate-uridylyl-transferase,简称UGPase)基因缺失候选疫苗株,并对其侵染宿主巨噬细胞的能力及毒力进行初步分析.方法 采用PCR技术对羊布鲁菌的UGPase基因上、下游同源臂进行克隆,利用基因同源重组技术构建自杀质粒,经两步筛选法对重组菌株筛选后,进行巨噬细胞黏附侵袭试验和小鼠体内毒力试验.结果 自杀质粒pBK-CMV-SacB-△UGP构建成功,经双向筛选获得了羊布鲁菌UGPase基因缺失株16M△UGP.16M△UGP缺失株侵入巨噬细胞的CFU数低于16M强毒株,但高于M5疫苗株;小鼠攻毒14 d后,其平均脾指数为(6.55±0.27)g,平均克脾菌数为1.64×104 CFU/g,均低于16M强毒株.结论 成功构建了羊布鲁菌16M株的UGPase基因缺失株,并证实了UGPase基因的缺失对16M株毒力具有一定影响.
关键词： 羊布鲁菌 UGPase基因缺失株 毒力
