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丙型肝炎病毒感染对内皮细胞趋化因子配体1表达的影响
目的 探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染对肝细胞及血管内皮细胞趋化因子配体1[chemokine (C-X3-C motif) ligand 1,CX3CL1]表达的影响.方法 分别以0.5 MOI感染性HCV病毒颗粒(cell-culture-derived infectious HCV,HCVcc)感染Huh7细胞48 h、以不同剂量(0.1、0.2、0.5、1μg)的HCV RNA转染HepG2细胞48 h、以0.5和1.0 MOI HCVcc感染过表达人CD81的HepG2细胞48 h后,抽提各步细胞总RNA,采用Real-time PCR法检测HCV感染肝细胞对胞内CX3CL1 mRNA表达的影响.分别以1.0 MOI HCVcc刺激HUVEC 48h、以0.1、0.2、0.4、1.0 MOI HCVcc刺激人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC) 48 h、以0.5 MOI HCVcc刺激Huh7和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)共培养细胞体系48 h,抽提各步细胞总RNA,采用Real-time PCR法检测HCVcc刺激内皮细胞对胞内CX3CL1表达的影响.结果 与未感染细胞对照相比,0.5 MOI HCVcc感染的Huh7细胞中CX3CL1 mRNA水平上调2倍多(P＜0.05),随着HCV RNA转染HepG2细胞剂量的增加,CX3CL1 mRNA水平随之升高,组间差异有统计学意义(P＜0.05),0.5和1.0 MOI HCVcc感染过表达CD81的HepG2细胞,胞内CX3CL1 mRNA水平分别上调7.56和13.91倍(P＜0.05).与未刺激细胞对照相比,HCVcc刺激HUVEC可引起胞内CX3CL1的mRNA水平上调5倍多(P＜0.05);与HCVcc未刺激的共培养组相比,与HCVcc感染的Huh7细胞共培养的HUVEC胞内CX3CL1 mRNA水平上调约13倍,HUVEC受HCVcc刺激后,CX3CL1 mRNA水平的上调幅度高于HUVEC单独培养组(P均＜0.05);与未刺激细胞对照相比,0.1、0.2、0.4和1.0 MOI HCVcc刺激HBMEC可引起胞内CX3CL1 mRNA水平上调1.71、2.37、2.85和3.05倍(P＜0.05).结论 HCV感染可引起肝细胞和血管内皮细胞CX3CL1表达上调,HCVcc感染肝细胞释放的细胞因子也是促进内皮细胞CX3CL1表达上调的刺激物,为HCV感染引起肝外疾病产生的机制提供了参考.
