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狂犬病病毒糖蛋白富集表位基因克隆及其在原核系统中的表达
目的 构建狂犬病病毒标准强毒株(CVS-24)糖蛋白富集表位基因原核表达系统.方法 通过RT-PCR扩增CVS-24株糖蛋白两段表位富集区基因,并将其克隆至载体pET-28a(+),构建重组表达质粒pET-G1和pET-G2,转化大肠杆菌Rosetta,IPTG诱导表达.表达产物分别经12%SDS-PAGE和Western blot检测.结果 大肠杆菌可高效表达目的基因,所表达的蛋白可被狂犬病病毒标准阳性血清所识别.经薄层扫描分析,目的蛋白表达量可占菌体总蛋白的42%(G1)和34%(G2).结论 已成功构建了狂犬病病毒标准强毒株(CVS-24)糖蛋白富集表位基因原核表达系统,所表达的目的蛋白具有良好的免疫反应性,有可能作为检测狂犬病病毒血清抗体的候选基因.
