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PPLO培养基文献资料
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试验设计法优化肺炎支原体培养基
目的 试验设计(design of experiment,DOE)法优化肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)培养基,以期提高MP产量.方法 以MP(FH株)为试验菌株,PPLO培养基为基础,菌体蛋白含量为响应值,采用Plackett-Burman试验、陡爬坡试验及Box-Behnken试验对脑心浸液、水解乳蛋白、(月示)胨3号、精氨酸、小牛胸腺DNA、葡萄糖和胰蛋白胨7种培养基添加成分进行筛选及优化.以菌体蛋白含量及颜色变化单位(color change unit,CCU)为指标,验证改良培养基培养MP的效果.结果 培养基各添加成分对MP生长影响作用大小依次为葡萄糖、胰蛋白胨、脑心浸液、精氨酸、(月示)胨3号、水解乳蛋白、小牛胸腺DNA,终筛选出脑心浸液、葡萄糖及胰蛋白胨3种添加物,适浓度分别为5.68、1.34及2.64g/L.采用改良培养基培养MP 96 h时,菌体蛋白含量及CCU达大,分别为851.29 μg/mL及109 ccu/mL.结论 DOE法实现了对MP培养基的优化,获得了影响MP生长的主要参数,提高了MP菌体产量.
