首页 > 文献资料
-
淋病奈瑟菌表面蛋白A基因真核表达质粒诱导的小鼠特异性体液免疫应答
目的 观察淋病奈瑟菌表面蛋白A(Neisseria surface protein A,NspA)基因真核表达质粒不同免疫途径诱导的小鼠特异性体液免疫应答效果.方法 将NspA基因真核表达质粒pcNspA通过肌肉、滴鼻和阴道3种途径免疫BALB/c小鼠,分别于0、2、3、4周各免疫1次,末次免疫后2周,收集各组小鼠血清、支气管肺泡洗液和阴道洗液,采用间接ELISA方法检测特异性抗体效价;并检测抗体介导的补体溶菌活性.结果 滴鼻免疫和肌肉免疫pcNspA质粒均可诱导小鼠体内产生较高水平的特异性IgG和IgA抗体,而且滴鼻免疫组在支气管肺泡洗液和阴道洗液中均可检测到特异性sIgA抗体,而阴道免疫组仅在阴道局部检测到较低水平的特异性sIgA抗体;滴鼻免疫组小鼠血清具有溶菌活性.结论 淋病奈瑟菌NspA基因真核表达质粒可诱导小鼠体内产生特异性抗体,并具有抗菌活性;滴鼻免疫可能是其更有效的免疫途径.
-
pcDNA3.1(+)/NspA真核表达载体的构建及鉴定
目的构建pcDNA3.1(+)淋病奈瑟菌外膜蛋白-奈瑟菌表面蛋白A(Neisseria surface Protein A,NspA)基因真核表达载体,为研制淋病奈瑟菌核酸疫苗奠定基础.方法根据淋病奈瑟菌NspA基因序列,设计合成一对引物,用PCR方法从淋病奈瑟菌基因组DNA中扩增出NspA基因片段,将扩增的产物连接于测序载体pUCm T上,并构建重组体pcDNA3.1(+)/NspA,进行酶切、PCR及测序鉴定. 结果 NspA基因体外扩增产物大小约为525 bp.所构建的pcDNA3.1(+)/NspA重组体经双酶切及PCR鉴定,与预期片断的大小相符;测序结果与GenBank中收录的NspA全长序列一致,表明pcDNA3.1(+)/NspA真核表达载体构建正确.结论成功地构建了淋病奈瑟菌真核重组表达载体pcD-NA3.1(+)/NspA,为NspA蛋白的功能研究和淋病奈瑟菌核酸疫苗的研制提供了物质基础.
关键词： 淋病奈瑟菌 表面蛋白A pcDNA3.1(+) 克隆 疫苗 -
肺腺癌组织中TTF-1和SPA的表达对EGFR突变的临床预测价值
目的 探讨肺腺癌组织中甲状腺转录因子(thyroid transcription factor-1,TTF-1)和表面活性物质A(surfactant protein-A,SPA)的表达对表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变状态的临床预测价值.方法 收集2005年1月至2011年11月在河南省肿瘤医院行EGFR突变检测的肺腺癌患者235例,其中能找到石蜡组织共120例,采用免疫组织化学方法检测组织中的TTF-1和SPA的表达.分析TTF-1和SPA的表达与EGFR突变状态、临床特征的关系.结果 入组患者的EGFR突变率为43.8％(103/235)；其中的120例患者中有50例发生EGFR突变；TTF-1阳性表达多见于女性(P =0.029)、不吸烟(P=0.025)和Ⅰ～Ⅱ期(P =0.044)患者；EGFR突变多发生于TTF-1或者SPA(P＝0.043)阳性表达患者,TTF-1阴性表达时EGFR很少发生突变(P=0.004),TTF-1对EGFR突变状态的阴性预测价值高达92.6％;TTF-1表达与SPA表达呈显著正相关(r=0.380,P=0.005).结论 肺腺癌组织中TTF-1和SPA的表达情况能预测EGFR突变状态,TTF-1或者SPA阴性表达患者很少发生EGFR突变；TTF-1和SPA的表达具有很好的相关性.
