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mda-7/IL-24基因与肿瘤
在人类黑色素瘤细胞株(HO-1)中克隆了一个位于1q34.2-q41的新的黑色素瘤分化相关基因mda-7.该基因有7 025个碱基组成,含7个外显子6个内含子,编码大小为23.8kDa蛋白,由206个氨基酸序列组成.对多种肿瘤细胞具有抑制生长,诱导凋亡的作用,是一个新的肿瘤抑制基因.
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mda-7/IL-24通过内质网应激通路诱导肝癌细胞生长抑制和凋亡
目的:观察mda-7/IL-24对不同类型的肝肿瘤细胞及正常肝脏细胞增殖及凋亡的影响并探讨其可能的作用机制.方法:构建携带mda-7基因的重组腺病毒Ad-mda-7,转染肝癌细胞系HepG2、Hep3B、PLC/PRF/5和正常肝细胞L02,MTT法和流式细胞术检测细胞增殖及凋亡情况,Western印迹检测细胞相关蛋白的表达.应用钙蛋白酶抑制剂Ⅰ (ALLN,25 μmol/L)预处理上述细胞30 min,观察阻断内质网应激通路后上述指标的变化.结果:MTT法和流式细胞术检测结果表明,与感染Ad-GFP比较,Ad-mda-7选择性抑制肝癌细胞生长(P<0.01),诱导肝癌细胞凋亡(P<0.01,其中对HepG2细胞影响明显),而对正常肝细胞生长无明显影响;ALLN预处理能部分抑制Ad-mda-7的上述作用.Western印迹结果表明Ad-mda-7 能诱导HepG2细胞BiP/GRP78、Bax蛋白高表达(P<0.01),caspase-12、caspase-3活化及p38 MAPK磷酸化;ALLN预处理能抑制Ad-mda-7转染引起的Bax蛋白高表达及caspase-12、caspase-3活化;而对BiP/GRP78的高表达及p38 MAPK磷酸化无影响.结论:mda-7/IL-24可能通过内质网应激通路诱导肝癌细胞生长抑制和凋亡.
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腺病毒介导mda-7联合阿霉素对肝癌移植瘤生长的影响
研究发现mda-7基因能阻滞多种癌细胞增殖、促进细胞凋亡,对肿瘤具有选择性杀伤作用,而对正常细胞不起不良反应[1],且对肺癌的生长抑制作用与血管生成的减少相关[2].本实验应用重组腺病毒载体介导mda-7并在裸鼠体内表达.
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PEgr-MDA7重组质粒辐射诱导特性的检测
背景与目的:克隆人MDA7 cDNA基因,构建pEgr-MDA7重组质粒并检测其在人食管癌细胞系EC9706中经辐射诱导后mRNA水平.材料与方法:从人外周血mRNA中克隆人MDA7 cDNA基因,连接到Egr-1启动子的下游构建成pEgr-MDA7重组质粒,利用脂质体介导转染人EC9706细胞,用定量PCR方法检测不同剂量X射线照射后被转染细胞中MDA7的mRNA水平.结果:测序结果证实MDA7 cDNA基因序列正确,酶切鉴定证实pEgr-MDA7重组质粒构建正确.被pEgr-MDA7重组质粒转染的人食管癌EC9706细胞经不同剂量X射线照射后,MDA7基因mRNA水平均高于未照射组.结论:X射线可诱导pEgr-MDA7重组质粒在人EC9706细胞中表达增强.
关键词： mda-7基因 pEgr-MDA7重组质粒 辐射
