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高效液相色谱技术在食品卫生领域的应用
高效液相色谱( HPLC)是 60年代后期发展起来的分离分析技术,是现代分离测定的重要手段.问世以来,因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、药物及临床分析.近年来,随着色谱技术的不断发展,各种工作站软件的开发,以及与质谱等仪器的联用,大大拓宽了 HPLC的应用范围.目前很多新型专用的 HPLC仪不断出现,如氨基酸分析仪、糖分析仪、离子色谱仪等相继出现.我国在食品卫生领域的应用始于 70年代末, 90年代后期国家标准中开始将 HPLC法列为检测食品中的污染物、营养成分、添加剂、毒素等的国标方法,本文综述了 HPLC在食品的营养成分、添加剂、有毒有害成分、无机成分等几方面的应用及进展.
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氨基酸分析仪测定牛奶中氨基酸的前处理探讨
目的:在不同反应温度、酸度条件下,探讨氨基酸分析仪对测定不同前处理条件下对氨基酸测定的影响.方法:消化温度为100～ 130℃,反应酸度为1.0～4.0 ml浓盐酸,氨基酸测定按(GB/T 5009.124-2003)食品中氨基酸的测定方法进行.结果:反应温度在90～ 130℃时,样品回收率82.1％～106.1％ (P＜0.01),佳反应温度为110℃;浓盐酸加入量为0.5～2.5 ml时,样品回收率为86.9％～103.6％(P＜0.05),佳反应酸度为1.5 ml.结论:氨基酸分析仪测定牛奶中氨基酸时,体系中反应温度和酸度对测定有较大影响,必须加以控制,才能确保测定结果有理想的精密度和足够的准确度.
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氨基酸分析仪测定胱氨酸片中胱氨酸的含量
目的:《中华人民共和国药典》(以下简称中国药典)2015年版采用滴定法测定胱氨酸片中胱氨酸的含量,操作烦琐,所以建立简便、快速的氨基酸分析仪测定胱氨酸片中胱氨酸含量的方法.方法:采用直接超声溶解法上机测定,Sykam Cation Separation Coiumn(LCA KO6/Na 4.6 mm×150 mm,7 μm)分离柱,梯度洗脱,分光光度检测器,柱温为57～74℃梯度控温,反应器温度为130℃,检测波长570 nm.结果:胱氨酸在5.01～100.18 μg·mL-1之间呈良好的线性关系(r=0.999 9,n=6),平均加样回收率为100.0％(n=9),检出限为0.26 μg· mL-1,含量测定结果与滴定法相比较,无显著性差异.结论:与中国药典的滴定法比较,该法准确、简易、稳定,适合胱氨酸片中胱氨酸的含量测定.
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HPLC法和氨基酸分析仪(AAA)法测定肠外营养注射液(25)中18种氨基酸的含量的比较
目的:RP-HPLC法和氨基酸分析仪(amino acid analyzer,AAA)法测定氨基酸含量的比较.方法:采用高效液相色谱仪和氨基酸分析仪测定肠外营养注射液(25)中18种氨基酸的含量.采用C18柱和异硫氰酸苯酯进行柱前衍生化,加入二硫代二丙酸作为保护剂,同时测定半胱氨酸；AAA法采用离子交换色谱柱和茚三酮柱后衍生化进行,不需加入保护剂,直接测定半胱氨酸.结果:RP-HPLC法和AAA法的重复性分别小于1.1％和3.1％,2种测定方法的相对偏差在0.19％～8.2％之间.结论:AAA法更适于肠外营养注射液(25)种18中氨基酸的测定.
