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RNF13通过IRE1/XBP-1通路调控内质网应激介导的细胞凋亡
目的:在研究内质网应激介导的细胞凋亡过程中,我们发现Ring finger protein13(RNF13)具有促进细胞凋亡的功能.我们拟研究沉默RNF13后细胞对Tunicamycin等引起的细胞凋亡的影响,以及RNF13对活性形式的caspase3,XBP1 (X-box binding protein 1)的剪切以及IRE1(Endoplasmic reticulum to nucleus signaling 1)磷酸化的影响以有助于了解RNF13促进细胞凋亡的信号通路的研究.方法:基因沉默RNF13,利用MTT方法研究RNF13沉默后对细胞增殖的影响,RNF13基因沉默后对XBP1剪切的影响,免疫印迹观察RNF13对IRE1磷酸化的影响.结果:RNF13基因沉默效率在80%以上.RNF13基因沉默后明显抑制细胞凋亡;敲低RNF13的细胞可抵抗衣霉素以及毒胡萝卜素的诱导的细胞凋亡.Caspase-3是细胞凋亡的关键蛋白.敲低RNF13后caspase-3的活性形式明显降低(降低70%,P<0.001).在加入衣霉素引起内质网应激的情况下,敲除RNF13的细胞XBP1的切割活性明显降低.敲除RNF13的细胞中IRE1的磷酸化明显降低(降低90%,P<0.001).结论:RNF13通过IRE1-XBP1信号通路调节细胞凋亡.