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限制片段差异显示PCR分析金属基质蛋白酶家族在乳腺癌表达的差异
目的:建立乳腺癌差异表达谱,以筛选乳腺癌相关候选基因;比较金属基质蛋白酶家族(matrix metalloproteinases, MMPs)在乳腺癌中的表达差异.方法:采集乳腺癌组织、转移淋巴结及正常乳腺组织,用限制片段差异显示PCR技术(Restriction fragments differential display PCR, RFDD-PCR)建立表达谱.以电泳和荧光扫描成像对表达谱片段进行分离、显示.筛选分析MMPs及其相关基因的表达差异.结果:共获得5407个基因片段,差异片段占30%以上;共显示13个MMPs基因及其相关基因金属蛋白酶组织抑制因子和转化生长因子β.其中除MMP20外,其余均有量或质的差异.结论:有多个MMPs基因参与了乳腺癌的发生、发展过程,其中MMP2、MMP10、MMP11、MMP14、MMP15、MMP28基因的开启可能为肿瘤进程的早期事件.
关键词： 金属基质蛋白酶 差异表达谱 乳腺癌 限制片段差异显示PCR -
涎腺腺样囊性癌高、低转移细胞系基因表达谱及基质金属蛋白酶表达差异
目的 筛选与涎腺腺样囊性癌转移相关的候选基因,并对其中的候选基因进行初步的验证.方法 用限制片段差异显示PCR技术(restriction fragments differential display PCR,RFDD-PCR)建立涎腺腺样囊性癌高、低转移细胞株(ACC-M、ACC-2)的表达谱.对两个表达谱的片段进行比较,通过生物信息学的分析,初步筛选出候选基因.用半定量逆转录PCR技术对筛选出的基因进行初步验证.结果 RFDD-PCR方法共获得5420个基因片段,其中包含12个基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)基因.半定量逆转录PCR方法发现MMP2、MMP7、MMP9、MMP14、MMP15、MMP24在ACC-M和ACC-2中的表达存在明显差异.结论 构建了ACC-M和ACC-2细胞株的表达谱,为寻找目的基因奠定了基础.发现MMP2、MMP7、MMP9和MMP15与涎腺腺样囊性癌的发生、发展、转移有关,不同肿瘤细胞的转移能力可能与不同的MMPs家族基因相关.
关键词： 限制片段差异显示PCR 差异表达谱 涎腺腺样囊性癌 基质金属蛋白酶
