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电刺激与冷冻固定同步以获得生物组织毫秒级功能变化时的超微结构
生物组织功能变化发生时间历程极短(以毫秒计),常规化学固定(固定时间以分钟计)无法保留其瞬间超微结构变化,这也是细胞生物学、细胞生物物理学亟待解决的难题.我们采用红外线技术和计算机技术控制电刺激-超低温快速冷冻固定(微秒级),并以骨骼肌为研究对象,分别在对骨骼肌电刺激后0.8、5.6、8.4 ms,对其进行超低温快速冷冻固定,并采用冷冻置换技术作后处理,因而完全保留了骨骼肌在兴奋-收缩偶联发生时的超微结构特点.
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五种冷冻固定液的比较
冷冻切片的质量是术中病理正确诊断的保证.冷冻切片质量受多种因素影响,固定是冷冻切片首要而且关键步骤.由于各种固定液的渗透强弱不同,直接影响细胞的固定效果而影响染色效果.笔者用几种冷冻切片固定液进行比较,现将结果报告如下.
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泪膜的结构及功能研究进展
泪膜为覆盖眼球前表面的一层液体薄膜,其范围由上下睑缘所限定,并由睑缘所牵张.传统的观念认为泪膜由内而外分为三层:黏液层、水样层和脂质层[1].但这一观点逐渐被摒弃,因为这一观点是建立在以往传统的化学固定法的基础上对泪膜进行研究的,由于化学固定法会破坏泪膜的形态学,故不能真实反映泪膜的结构.近几年对泪膜的研究通常采用活体内冷冻固定、冰冻替代切片、电镜观察的方法,但主要基于动物实验.泪膜与眼表疾病关系密切,泪膜的改变常是诱发眼表疾病的重要原因,而眼表疾病的诊断、治疗均与泪膜的结构及功能密切相关.现就近年来国内外在泪膜的结构及功能方面的研究进展作一综述.