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不育患者精子头部超微结构变化的电镜观察
目的 观察精子头部的正常和异常超微结构,依据两者的差异,探讨精子头部损伤引起不育的机理.方法 取正常人和不育患者精子,在光学显微镜观察后,制备冷冻蚀刻复型膜和超薄切片样品,在透射电镜下观察并拍照.结果 冷冻蚀刻复型膜观察可见正常精子头是由质膜包裹的细胞核和顶体构成,分前中后三区;细胞核染色质为螺旋状,规则排列为8~11行;核膜孔位于后头区,有140~180个,分6排,呈六角形排列.异常精子头表现为质膜破裂、不光滑,膜蛋白变性、脱落、凝聚,细胞核内出现大空洞,染色质断裂、紊乱,核膜孔数量减少、排列紊乱.结论 本研究提供了正常及异常精子头部的各种超微结构表现,可作为研究精子膜结构及不育机理的参考.正常精子头的细胞核呈高度有序结构,而异常精子头部有不同程度损伤;冷冻蚀刻复型膜技术是在超低温,高真空条件下将质膜从双分子层的疏水区劈开,在透射电镜下清晰地观察到E面和F面的结构和膜蛋白数量分布等,是显示精子膜结构和膜损伤的佳技术手段.
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酒精对丙烯腈致神经细胞畸形及凋亡的影响
饮酒是许多人的一种生活嗜好.有报道认为酒精有辅助致癌作用,可使一些致死原因(包括毒物)的危险性增加[1].丙烯腈是重要的化工原料,也是高毒性化学物,是致突变剂和潜在的人类致癌剂.本实验用电镜观察了亚急性口服酒精和丙烯腈大鼠的脑组织,研究酒精对丙烯腈致脑微循环及神经细胞凋亡和畸形的影响,旨在探讨酒精对毒物效应尤其是对致突变剂和可疑致癌物毒效应的影响.
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非平衡等离子体微型消毒器模型的性能研究
目的 研制非平衡等离子体微型消毒器模型并观察其杀菌效果.方法 采用载体定量杀菌试验方法和电镜观察法,对非平衡等离子体微型消毒器模型杀菌效果进行实验室观察.主要部件涉及变压器、陶瓷电极和分散器等;根据物品表面消毒的实际需要,以细菌繁殖体为试验菌,用载体法进行杀菌试验,根据活菌计数和电镜观察法初步鉴定消毒器模型消毒效果.结果 微型消毒器模型发射的等离子体为紫蓝色气体状物质.经该微型消毒器产生的平均温度约40℃等离子体处理20 s后,对纸片上金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌的杀灭率均达到100%.作用后标本经透射电镜观察到细菌形态变异,菌体结构受到明显破坏.结论 非平衡等离子体微型消毒器可产生温度低、具有良好杀菌作用的等离子体,达到设计目标.
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副衣原体BN9株成堆裸露颗粒的发现及其形成机制探讨
目的探索副衣原体在棘阿米巴内的生长发育变化特征.方法采用阿米巴共培养技术,通过染色和电镜观察了解不同时期滋养体中副衣原体生长的形态变化.结果在电镜下,可见副衣原体BN9存在典型的二个生活形态:即网织体和原体,在滋养体内可形成成熟的吞噬内体,网织体在吞噬内体内以二分裂方式繁殖,然后发育成成熟的原体颗粒,吞噬内体中,可见原体与网织体并存;胞浆中可见较多的游离原体颗粒.在成熟囊胞中,胞浆内可见较多的游离原体颗粒.感染后期,观察到成堆的的圆形裸露的颗粒,有原体和网织体,而宿主阿米巴的细胞结构已被溶解,吉姆尼兹染色表现为蓝紫色.结论副衣原体在阿米巴内可形成吞噬内体,出现二个发育期:网织体期和原体期,可发生胞内释放,反复形成吞噬体而复制繁殖,终导致阿米巴滋养体裂解或溶解;轻度感染的滋养体可发生囊胞化,成熟囊胞的胞浆内可携带有感染能力的原体颗粒.
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国产姜黄属植物叶表皮的组织形态学观察
目的:为姜黄属植物分类与药材鉴定提供参考.方法:分别应用扫描电镜和光学显微镜,对姜黄属植物叶表皮结构和特征进行较系统的观察.结果与结论:姜黄属植物种间叶表皮特征无明显区别,但在气孔、副卫细胞和表皮细胞的形状、大小和密度以及被毛情况等方面存有不同程度的差异,这些差异可作为姜黄属植物分类与药材鉴定的重要依据.
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2.68肠易激综合征患者分泌5-羟色胺的肠嗜铬细胞形态及功能改变
目的研究肠易激综合征(IBS)患者的肠嗜铬(EC)细胞及其合成和储存5-HT的功能变化.方法按罗马Ⅱ诊断标准,并依其分型标准区分腹泻型及便秘型IBS.取IBS患者肠镜活检标本进行Envision法免疫组化染色.部分活检标本电镜下观察EC细胞形态及功能.免疫组化染色及电镜观察均设正常对照组.
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冰冻切片进行免疫电镜的新尝试
利用冰冻切片制作电镜标本,由于冰晶的大量出现无法进行超微结构的识别,故很少有人涉足.在免疫电镜及酶细胞电镜等研究中,需要定位后进行电镜标本制作,为了避免冰晶的出现,只能使用非常烦琐的振动切片机切片.若进行系统的光镜、电镜观察,就更加困难.为此我们经过反复实验,不断探索,成功地使用冰冻切片进行脑组织免疫电镜的标本制作,改变了传统的冰冻切片不能制作电镜标本的观念,并取得了极为理想的效果.
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重视开展临床病理学,临床影像学的研究
病理学是研究疾病的发生、发展及转归的医学基础学科,是基础和临床医学的重要桥梁.病理学的发展是临床医学中提高医疗质量的重要途径之一.病理诊断学的发展经历了各个阶段:直接观察水平\光镜和电镜观察水平,分子检测水平和基因水平.目前常规病理检查来自活检\脱落的细胞检查和尸检.尸检是重要的病理检查途径,但是大多数医院尸检率极低,不到10%.尸检在提高临床诊断水平中起来非常重要的作用.今后医院应设法提高尸检率.
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保元汤加减对实验大鼠肺孢子虫作用的电镜观察
目的探索中医药治疗卡氏肺孢子虫肺炎的途径. 方法应用中药保元汤加减煎剂给实验大鼠灌胃,通过透射电镜观察其对实验大鼠肺内肺孢子虫的作用. 结果实验组较对照组大鼠肺内肺孢子虫有明显改变.其中肺孢子虫胞浆内大量空泡形成;包囊壁明显破坏;虫体有溶解现象. 结论保元汤加减煎剂,对实验大鼠体内的卡氏肺孢子虫具有抑制和杀灭作用.
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胸腺巨大类癌一例
患者男,61岁。因无明显诱因出现咳嗽、咳白粘痰1个月而就诊,于2000年2月20日入院。CT 检查示左上纵膈有一2 5 cm×20 cm巨大肿块,突向左侧胸腔。术中所见:肿块大小约25 cm×20 cm×20 cm,位于左上前纵膈,源于胸腺左下极,肿块包膜完整,血运丰富。 病理检查:椭圆形肿物约25 cm×20 cm×10 cm,包膜完整,切面灰白暗红相间,质嫩,鱼肉状,部分呈囊性,重1 kg。镜下检查:肿瘤由较单一的小圆细胞组成,瘤细胞核小而规则,圆或卵圆形,胞质少到中量,淡嗜碱性。瘤细胞排列成不规则巢状,梁索状,癌细胞巢间及周围血窦丰富。组织化学染色:嗜银染色阳性。免疫组织化学标记示:突触素、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、嗜铬粒素A均阳性,上皮膜抗原阴性。电镜观察:癌细胞核呈圆形或卵圆形,常染色质丰富,少量异染色质贴于核膜下或呈小块状散在于核内。胞质内见圆形的分泌颗粒,直径约150~200 nm,有单层界膜和窄晕。
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临床肾脏穿刺超微病理诊断透射电镜制样的方法改进
肾脏疾病是临床常见的疾病之一,严重地威胁着人类的健康.随着肾脏穿刺组织病理活检技术的广泛开展,电镜超微病理诊断已成为肾脏疾病病理诊断中常规的检查方法,研究显示电镜观察对30%~50%的肾活检病例的诊断提供有价值的信息,电镜技术从过去的单纯应用于科研走向临床辅助检查,对肾脏疾病阐明病因、发病机制发挥了重要作用.同时,电镜对一些光镜认识不清的肾病能起到确定诊断、辅助诊断和分型的作用,对其他组织肿瘤的诊断、分型、识别组织来源、判断预后等,以及对肌肉的疾病、肝脏淤胆性疾病的诊断方面也都起到重要的作用.
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乙型肝炎病毒相关性肾炎的超微结构及免疫电镜观察
近年来的研究发现,乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)的肾小球内可见病毒样颗粒结构,并可在HBV-GN肾组织内检测到HBV DNA及HBV RNA,因而提出"HBV在肾组织直接感染及复制”的观点[1,2].我们通过电镜观察,旨在探讨HBV-GN的发病机制及其超微结构特征.
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抗生素"17997"对单纯疱疹病毒抑制效果的实验观察
"17997"是从我国云南省土壤中分离到的一株放线菌产生的抗生素,在抗病毒药物筛选中发现其具有广谱抗病毒作用.抗生素"17997"为非核苷类化合物,体内外抗病毒活性强,有剂量反应关系.在对细胞无毒浓度下可显著抑制单纯疱疹病毒(HSV)1、2型、人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)、水疱性口炎病毒及柯萨奇病毒B3,IC50在μmol/L水平.本实验运用光镜和电镜观察不同时间给予抗病毒抗生素"17997"对HSV-1的抑制作用,为临床合理应用提供实验室依据,为进一步探索其可能的作用机制提供线索.
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病毒性腹泻的预防和控制
腹泻一直是危害人类健康特别是婴幼儿健康的常见病和多发病,该疾病由多因素多病原引起,以往确认的病原多为细菌,其次是寄生虫和真菌.20世纪70年代初,用电镜观察发现了与腹泻相关的病毒,从此确认了病毒是导致腹泻的主要病原之一.在我国,病毒性腹泻又常被称为病毒性急性胃肠炎,属于<中华人民共和国传染病防治法>规定的丙类传染病--其他感染性腹泻中的一大类.
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Mimivirus——一种可能的新呼吸道病毒
Mimivirus初发现于英格兰北部城市Bradford一座冷却水塔的水中,曾经被误认为是一种新的细菌(Bradford球菌).后来经电镜观察,发现它在宿主阿米巴细胞中呈规则的廿面体结构,直径达400nIn,外面没有包膜,而是环绕着一圈80 nm长的众多纤毛(fibril).
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肥大细胞在胃嗜酸性肉芽肿发病中的作用
目的:探讨肥大细胞在胃嗜酸性肉芽肿发病中的作用.方法:应用免疫组化SP染色检测胃嗜酸性肉芽肿中的肥大细胞及微血管密度;HE染色计数嗜酸细胞;电镜观察肥大细胞J脱颗粒情况.结果:肥大细胞数量在胃溃疡和胃嗜酸性肉芽肿中差别无显著性(9.1±3.0 vs 8.9±3.0,P>0.05);脱颗粒肥大细胞数量及比例在胃嗜酸性肉芽肿组明显高于胃溃疡组(73±2.4vs 4.3±1.4、80.3±15.7%vs 48.4±15.7%,P<0.01);肥大细胞高计数组微血管密度高于肥大细胞低计数组(57.3±10.7 vs 32.4±7.2,P<0.01);脱颗粒肥大细胞与嗜酸细胞具有正相关性(r=0.931,P<0.01).结论:肥大细胞在胃嗜酸性肉芽肿中可促进嗜酸细胞浸润及血管新生,可能在胃嗜酸性肉芽肿发病中起重要的作用.
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氧化苦参碱对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原表达的影响
目的:研究口服氧化苦参碱对CCl4诱导的大鼠肝纤维化组织Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原表达的影响.方法:♂ Wistar大鼠140只随机分为正常对照组(n=20)、CCl4模型组(n=30)、氧化苦参碱预防低剂量组(n=30)、中剂量组(n=30)和高剂量组(n=30).氧化苦参碱低、中、高剂量组大鼠氧化苦参碱的用量分别为30,60,100 mg/kg,每日灌胃1次,共12 wk.肝组织学检查观察肝组织炎症和纤维化程度,免疫组化观察肝组织中Ⅰ,Ⅲ和Ⅳ型胶原的表达,电镜观察肝组织的超微结构变化.结果:组织学检查结果表明对照组肝脏炎症和纤维化程度明显高于氧化苦参碱预防组;免疫组化检测表明预防对照组大鼠肝内有大量Ⅰ,Ⅲ和Ⅳ型胶原沉积,其中Ⅲ型和Ⅳ型胶原的沉积形成肝窦毛细血管化,而氧化苦参碱预防组肝内胶原沉积较少,无明显的肝窦毛细血管化形成;电镜学检查证明氧化苦参碱预防组肝细胞损伤程度较对照组显著减轻.结论:口服氧化苦参碱可减少CCl4诱导的大鼠肝纤维化组织中胶原的表达,对肝纤维化有预防作用.
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TRAIL诱导肝癌细胞系SMMC-7721的凋亡作用
目的:观察TRAIL诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用.方法:采用MTT法检测细胞存活分数;TUNEL法检测细胞凋亡率;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;电镜观察凋亡细胞超微结构.结果:TRAIL对SMMC-7721细胞的存活分数和凋亡率的影响呈典型的量效关系,经TRAIL作用后的细胞,流式细胞仪检测呈标准的亚二倍峰,电镜观察发现经TRAIL作用的部分细胞具有凋亡细胞的典型形态特征.结论:TRAIL可诱导SMMC-7721细胞凋亡.
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慢性胆囊炎患者胆囊内Helicobacter pylori的细菌学特征
目的:探讨慢性胆囊炎患者胆囊内幽门螺杆菌(H pylori)的细菌学特征.方法:采集手术切除的病理确诊为慢性胆囊炎的新鲜胆囊标本黏膜刮片,接种于H pylori培养板,培养及鉴定后与胃中分离的菌株进行形态学、生化反应、免疫组化、PCR扩增、电镜观察等方面比较.结果:分离出3株细菌,经形态学观察、生化反应、抗Hpylori抗体免疫组化染色,Hpylori尿素酶A、B基因扩增及电镜观察证明他们是H pylori,与同一患者胃内Hpylori比较,除胆囊内H pylori尿素酶活性低于胃内Hpylori外,其他性质均相同.结论:推测胆囊内H pylori可能主要是通过胆道逆行感染进入胆囊.
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胆囊幽门螺杆菌感染与胆囊炎的关系
目的:探讨胆囊内幽门螺杆菌(H pylori)感染与胆囊炎发生的关系.方法:对手术切除的病理确诊为慢性胆囊炎的胆囊分为Hpylori阳性组及Hpylori阴性组,因胆囊息肉行胆囊切除的病理证实无炎症的胆囊为对照组,光镜观察H pylori定植处黏膜上皮的变化及炎症情况、电镜观察胆囊上皮细胞超微结构变化、并检测组织炎症递质水平.结果:胆囊内有H pylori感染的患者胆囊黏膜胃化生显著高于胆囊内无Hpylori感染组,胆囊内Hpylori阴性组IL-1、IL-6、IL-8显著高于对照组,胆囊内Hpylori阳性组三项指标显著高于Hpylori阴性组及对照组.结论:胆囊内Hpylori感染可能是某些慢性胆囊炎的病因之一.