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蚊期文献资料
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影响疟原虫蚊期早期发育的因素
疟原虫在蚊体内的早期发育受很多因素的影响,适宜的pH值及环境温度是其生长的必要条件.蚊的一系列生理过程,如消化血液、运输代谢物、贮存基本营养物质以及对代谢产物的排泄等,都与疟原虫的发育密切相关.同时疟原虫还诱导蚊产生细胞和体液免疫,在很大程度上抑制了疟原虫的生长发育.而蚊-疟原虫间的相互作用,贯穿从配子发生、动合子形成、动合子穿越围食膜至中肠上皮及卵囊发育的整个过程.
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蚊期和红内期持续表达绿色荧光蛋白的重组约氏疟原虫
目的 构建蚊期、红内期持续表达绿色荧光蛋白(GFP)的约氏疟原虫BY265株.方法 用Sac Ⅱ酶酶切含有伯氏疟原虫ssu-rrna基因和CFP基因的重组质粒p10017使之线性化,用电转化的方法将该重组质粒转化入红内期约氏疟原虫BY265株,获BY265-EGFP重组疟原虫,尾静脉注射感染昆明小鼠,24～30 h后用乙胺嘧啶饲喂小鼠5～6 d,鼠尾静脉采血涂片观察原虫感染率.以疟原虫基因组DNA为模板,PCR鉴定转染重组质粒p10017的约氏疟原虫.斯氏按蚊叮咬感染BY265-EGFP重组疟原虫的小鼠,按蚊血餐后第7天和第16天解剖蚊胃和唾液腺,观察疟原虫能否在蚊体内正常发育.结果 荧光显微镜观察到呈绿色荧光的红内期各期形态正常的约氏疟原虫.PCR检测结果表明,GFP和ssu-rrna基因已成功整合到约氏疟原虫基因组中.按蚊感染实验证实重组BY265株能在蚊体内正常发育.结论 构建了蚊期、红内期持续表达绿色荧光蛋白的约氏疟原虫.
