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  • CLEC4M介导HCV感染人PBDC实验研究

    作者:王媛媛;聂青和;高禄化

    目的 通过对表达CLEC4M的CD14细胞与HCV结合来证实CLEC4M是介导HCV感染的特异性受体.方法 应用磁珠分选出健康人的CD14+细胞,检测表达CLEC4M后将细胞共分4组,阳性对照组:CLEC4M+HCV RNA+血清;干扰组:CLEC4M+鼠抗人CLEC4M抗体+HCV RNA+血清,每组均与收集到的3份HCV阳性患者血清作用,阴性对照组:CLEC4M+正常人血清;空白对照组:CLEC4M+ 5% DMEM.干扰组在加入3组HCVRNA+血清之前,先分别加入CLEC4M抗体进行干预,其余3组滴入同体积PBS.培养24 h后利用RT PCR检测细胞表面结合的HCV RNA含量,培养48 h后用免疫荧光法检测细胞与病毒结合情况.结果 流式结果表明分离出的CD14细胞中CLEC4M阳性率高达80%以上.RT-PCR结果显示干扰组HCV RNA含量明显低于阳性对照组.免疫荧光可直观看到阳性对照组有大量绿色荧光,而干扰组只有很少的部分,空白对照组和阴性对照组无荧光.结论 表达CLEC4M的CD14细胞可以与HCV结合,而病毒的结合可以被CLEC4M抗体竞争性抑制.

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