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家蝇发育过程中肠道可培养共生细菌的分离与鉴定
目的 研究家蝇(Musca domestica)不同发育阶段肠道中可培养共生细菌的组成. 方法 在无菌条件下,对不同发育阶段家蝇虫体进行体表消毒.对卵和孵化1d的幼虫,取5枚卵或5条幼虫,加1 ml无菌水研磨;对孵化2d以上的幼虫、蛹和成蝇,各虫期分别取5条,解剖出肠道,加1 ml无菌水研磨.取研磨液按传统分离培养法分离和鉴定家蝇肠道的共生细菌,挑取形态有差异的单菌落,置于LB培养基中小量培养,提取菌体DNA,PCR扩增16S rDNA基因,测序后在GenBank中进行比对,鉴定到属.计数家蝇不同虫期肠道中分离的细菌菌属数的变化情况. 结果 通过培养分离出家蝇各阶段肠道共生细菌26属,其中,卵期未分离到共生细菌,幼虫期分离到11属,蛹期分离到19属,成蝇分离到14属.不同虫期之间存在重复,幼虫期和蛹期共有的细菌有6属,分别为变形杆菌属(Proteus)、库特氏菌属(Kurthia)、博德特氏菌属(Bordetella)、微杆菌属(Microbacterium)、产碱杆菌属(Alcaligenes)和明串球菌属(Leuconostoc);蛹期和成蝇共有的细菌有3属,分别为鞘氨醇杆菌属(Sphingob ac te rium)、肠球菌属(Enterococc us)、苍白杆菌属(Ochrobactrum);幼虫期和成蝇共有的细菌有1属,为克雷伯菌属(Klebsiella);3个虫态共有的细菌有4属,分别为普罗威登斯菌属(Provide ncia)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、香味菌属(Myroides)和假单胞菌属(Pseudomonas).幼虫期、蛹期和成蝇革兰阳性菌的比例分别为4/11、6/19和3/14. 结论 在家蝇由幼虫经蛹发育到成蝇的过程中,其肠道中可培养细菌菌属数呈先上升后下降趋势,革兰阳性菌的比例逐渐下降.
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精子细胞、精子特殊结构的方法显示及其意义
精子细胞作为一种终末生殖细胞,丧失了其细胞分裂能力,通过变态发育成为形态结构与其相差甚远的精子.精子细胞及精子中存在一些如顶体泡、核环、环粒等特殊结构,而这些结构的观察不仅在形态学上对认识精子变态发育有重要意义,而且其结构的改变在研究生殖毒物的作用机制及临床诊断男性不育中也有重要作用.由于在HE染色中这些结构不能被显示,须借助电镜才能识别,因此为临床快速检查药物对男性损伤及诊断男性生不育障碍带来一定困难.如何使精子细胞、精子中的这些特殊性结构能快速的在光镜下显示出来,成为基础与临床研究中十分必要的问题.本实验选取成年雄性小白鼠,分别取睾丸精子细胞作滴片、附睾精子涂片,经AgNO3染色GiemSa复染后,在油镜下能使这些特殊结构清晰地显示出来,现报告如下.
