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  • 旋毛虫新生幼虫 p46 000 抗原基因的表达与抗原性分析

    作者:原丽红;付宝权;刘明远;高飞;张亚兰;吴秀萍;林本夫;李莲瑞;卢强;陈启军;P.Boireau

    目的对旋毛虫新生幼虫 p46 000 抗原基因进行原核表达并检测重组抗原的抗原性. 方法利用聚合酶链反应(PCR)扩增目的基因, 克隆到原核表达载体pET-28a, 构建重组表达质粒, 经酶切及测序鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3), 以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达.十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、酶联免疫吸附测定(ELISA)和蛋白质印迹法(Western blotting)分析表达产物. 结果 SDS-PAGE结果显示表达产物的分子量约为 Mr 48 000 , 与理论值相符.ELISA和Western blotting结果表明, 重组蛋白可被旋毛虫感染的猪血清和兔抗重组蛋白血清识别;兔抗重组蛋白血清可识别旋毛虫新生幼虫抗原 Mr 46 000 蛋白. 结论成功表达了旋毛虫新生幼虫 p46 000 抗原基因, 重组抗原具有良好的抗原性.

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