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  • 间日疟原虫环子孢子蛋白基因型的鉴别研究

    作者:黄天谊;王小力;黎学铭;黄亚铭;曾风秀;车莹;张思淼;付伟忠;张再兴;张国森;蔡贤铮;王善青;王光泽

    [目的]建立间日疟原虫环子孢子蛋白(CSP)基因分型法用于地理株的鉴定.[方法]Chelex-100离子交换法提取滤纸血样中的微量DNA;套式PCR和等位特异PCR技术、琼脂糖电泳分析法、斑点印迹和Southern印迹-探针杂交技术分别用于判别性片段的扩增、分析和鉴定.[结果]用本文描述的套式-等位-特异PCR分型法,从一小片滤纸血样提取的微量DNA中,扩增出不同长度范围的3种判别性片段:650~770bp(间日疟种特异),150~230 bp(温带族特异),588~615 bp(PV-2型特异).用本法检测参考虫株出现的带型和长度与设计的靶序列完全吻合.检测59份国内感染血样,42份鉴定为温带族虫株,15份为热带族虫株,2份为PV-2型虫株.4份境外感染血样中,2个巴基斯坦分离株均为温带族,缅甸和老挝各1株均为热带族虫株.[结论]①本法能同时区分PV-1型,PV-2型以及温带族与热带族虫株,且较现有(PCR-探针杂交)法更为简便、快捷;②现场血样初步检测结果显示:我国存在PV-1型(温带族与热带族)虫株和PV-2型虫株,也可能存在温带族东南亚组虫株.

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